前幾天，小賽收到了讀者提問：“想了解T細(xì)胞在體外的培養(yǎng)周期是多久？”在此我們也一并把答案分享給大家——原代T細(xì)胞一般在體外的培養(yǎng)時(shí)間不超過三周，用于功能實(shí)驗(yàn)的T細(xì)胞建議培養(yǎng)時(shí)間在14天以內(nèi)。

高活性高純度的免疫細(xì)胞制備是細(xì)胞研究治療的關(guān)鍵要素，因此，在細(xì)胞構(gòu)建及培養(yǎng)過程中我們需要了解多方面的問題。賽業(yè)生物基于多年的免疫細(xì)胞制備經(jīng)驗(yàn)，可為客戶提供包括T及CAR-T細(xì)胞、NK及CAR-NK細(xì)胞、通用型CAR-T細(xì)胞、鼠源CAR-T細(xì)胞在內(nèi)的多種免疫細(xì)胞制備服務(wù)。我們擁有：
高純度、高活性的T/NK細(xì)胞制備工藝
高陽性率的CAR-T/NK細(xì)胞制備工藝
高純度、高活性、高陽性率的UCAR-T細(xì)胞制備工藝
嚴(yán)格的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

不僅如此，我們能給予你關(guān)于CAR-T/其他細(xì)胞治療研發(fā)的全方位支持，從抗體開發(fā)、CAR病毒制備、免疫細(xì)胞制備和表型檢測，到細(xì)胞模型與動(dòng)物模型的構(gòu)建、體外/體內(nèi)藥效評價(jià)一應(yīng)俱全，歡迎咨詢在線客服。

T/CAR-T細(xì)胞制備
T細(xì)胞是機(jī)體中較重要的適應(yīng)性免疫細(xì)胞之一，基于嵌合抗原受體的T細(xì)胞（CAR-T）目前在腫瘤治療領(lǐng)域已取得諸多突破。賽業(yè)生物擁有豐富的T細(xì)胞制備經(jīng)驗(yàn)，能夠通過多種方法制備高純度的T細(xì)胞，不同的制備方法可獲得不同占比的CD4和CD8 T亞型細(xì)胞。我們還可提供定制化的CAR-T細(xì)胞制備服務(wù)，并且能夠保證所制備CAR-T細(xì)胞的抗腫瘤功能。

● CD19 CAR-T細(xì)胞制備

兩種方法擴(kuò)增的T細(xì)胞表型檢測
 

CD19 CAR-T細(xì)胞陽性率檢測

● GPC3 CAR-T細(xì)胞制備

GPC3 CAR-T細(xì)胞陽性率檢測

UCAR-T細(xì)胞制備
目前上市的CAR-T細(xì)胞藥物均為個(gè)體化的治療產(chǎn)品，其制備成本高、周期長、制備失敗風(fēng)險(xiǎn)性高、價(jià)格昂貴、難以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。因此，近年來通用型CAR-T細(xì)胞治療的研究也越來越受到重視。T細(xì)胞用于異體治療的障礙在于，其回輸后會(huì)造成嚴(yán)重的移植物抗宿主反應(yīng)（即GvHD）。現(xiàn)有的研究表明，TCR受體復(fù)合物是介導(dǎo)GvHD發(fā)生的重要分子，TCR復(fù)合物表達(dá)被阻斷的T細(xì)胞用于異體治療不會(huì)引起GvHD等毒副作用。基于CRISPR/Cas9技術(shù)，賽業(yè)生物建立了有效的TCRα以及CD52敲除工藝，結(jié)合慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)，能夠制備高純度、CAR分子高表達(dá)的通用型CAR-T細(xì)胞，可滿足不同靶點(diǎn)研究所需要的通用型CAR-T細(xì)胞的制備。

● GPC3 UCAR-T細(xì)胞制備

T細(xì)胞TCRα和CD52基因敲除細(xì)胞效率檢測

TCRα和CD52敲除細(xì)胞富集效率檢測

GPC3 UCAR-T細(xì)胞陽性率檢測

兩種NK細(xì)胞擴(kuò)增方法NK細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)統(tǒng)計(jì)
 

方法1擴(kuò)增NK細(xì)胞純度檢測
 

GPC3 CAR-NK細(xì)胞陽性率檢測

GPC3 CAR-Jurkat細(xì)胞構(gòu)建及功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果（A. GPC3 CAR-Jurkat細(xì)胞陽性率檢測結(jié)果，顯示成功構(gòu)建GPC3 CAR-Jurkat細(xì)胞；B. 肝癌細(xì)胞株表面GPC3抗原表達(dá)量檢測；C. GPC3 CAR-Jurkat細(xì)胞同肝癌HepG2細(xì)胞共孵育后檢測活化指標(biāo)CD69以及耗竭指標(biāo)PD-1和TIM-3的表達(dá)情況，顯示GPC3 CAR-Jurkat細(xì)胞能夠被靶細(xì)胞有效活化；D. 圖C的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。）