< THP-1 細胞簡介 >

THP-1細胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人單核細胞白血病細胞系。它來自一位急性單核細胞白血病患者的血液，有分化為多種巨噬細胞的能力，是各領域研究常用的細胞系之一。

THP-1是人外周血的單核細胞系，最初來源于急性單核細胞性白血病患者。屬于懸浮細胞，研究免疫和炎癥的理想工具。其表面抗原HLA型為：A2，A9，B5，DRw1，DRw2。

營養體系：細胞生長環境寧酸毋堿，開啟后的RPMI 1640培養基，建議一周內使用完畢。
推薦傳代比例：1:3-1:6，每2-3天換液一次。
培養條件：氣相：95%空氣+5%CO₂，溫度：37℃


01. 培養攻略 - 復蘇操作
/ 以T25培養瓶為例 /

1. 預熱水浴鍋至37℃；

2. 將細胞從液氮中取出后，放進一次性PE手套中，立即投入水浴鍋，迅速用力搖晃管子，使其在1分鐘內融化；

3. 酒精擦拭凍存管，進入生物安全柜，把融化的細胞懸液緩慢滴加到預先加入5ml完全培養液的T25培養瓶中；

4. 放入培養箱培養。​

• ​復蘇密度建議1*10^6 cells/ml

• 48小時不要動細胞，不要晃動培養皿，可以先豎直放置培養基

• 通常需要3-5天恢復，期間不做離心操作

• 可先提高THP-1細胞量，再去考慮解決細胞聚團或碎片的問題

02. 培養攻略 - 傳代操作
半換液法傳代操作 / 以T25培養瓶為例 /

圖片來源   thp-1細胞半換液 - Bing images

• ​營養液要給足。以T25培養瓶為例其營養液不要少于5ml

• 不要頻繁觀察細胞，最多一天一次即可

• 不要頻繁離心換液，當發現培養基有些變黃（橘紅色）再補液1-2ml即可

• 當細胞密度達到約2*10^6 cells/ml左右時（如果換液后培養基第二天便發黃，鏡下檢測無污染時）進行傳代

• 一定不要每天離心！最多一周離心一次

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1. 預先配制好凍存液；【推薦使用VivaCell: C3522-0100，即用型凍存液】

2. 細胞約200g 3min離心后，去上清，用配好的凍存液重懸細胞；

3. 轉移入凍存管，放進程序凍存盒。凍存盒放進-80度冰箱過夜，再放液氮長期保存。​

• THP-1細胞易受凍存影響，建議適量增加凍存細胞量(不低于1*10^6/支)

• 要在液氮中保存​

< 細胞聚團問題 >

1. 少量正常，建議不再處理，繼續培養細胞量。

2. 若較多，建議排查培養箱、營養體系的酸堿性、以及是否有新換血清。

1. 此細胞很容易分化成為巨噬細胞。

2. 少量正常，建議傳代時候丟棄。

3. 較多，建議選用非TC處理過的培養瓶、排查培養箱、營養體系的酸堿性、以及是否有新換血清。