293 無血清培養基 FH-293F

產品描述：
293 無血清培養基適用于懸浮培養條件下的 HEK293 細胞(如 293-F,293-T,Expi-293F 等) 高密度生長和瞬時轉染表達。 培養基含有細胞生長所需的全部營養成份， 無需 添加任何添加即可使用。(注意： 此培養基不包含抗生素以及血清)
產品特點:
瞬時轉染專用培養基， 適用于 HEK293 細胞高密度懸浮培養無蛋白、無動物源、化學成分限定即用型完全培養基,無需添加額外成分

基礎參數：

外觀：	澄清透明紅色液體
滲透壓：	275±15 mOSM
pH:	6.9-7.4
無菌檢測:	無菌
內毒素：	<5 EU/mL
儲存條件：	2-8℃，避光
效期：	12 個月
產品用途：	僅用于科學研究，不適用于人類或動物的診斷和治療

 
產品使用方法：
細胞馴化
1)直接馴化
大部分情況下，培養于其他培養基中的細胞， 可以直接適應 FH-293F ，只要按照日常傳代方 式(稀釋)更換培養基即可。

2)漸進式馴化
注意：選用低代次、處于對數生長期的細胞進行馴化
① 原培養基中復蘇細胞并繼續使用該培養基傳代 2 到 3 次至細胞生長穩定，當細胞密度達
到 2x10 6 cells/ml 后進行傳代，傳代細胞密度控制在 0.5-0.6×10 6 cells/mL，5-10% 血清的傳統培養基或其他無血清培養基與 FH-293F 的比例為 75:25；
②將細胞置于 37℃， 5% CO2，轉速為 110-175 rpm 的恒溫搖床中進行培養；
③當細胞密度 3-4 天后達到 3x10 6  cells/ml 且細胞活率>90%，傳代時 5-10%血清的傳統培
養基或其他無血清培養基與 293培養基 的比例為 50:50，細胞密度控制在 0.5×10 6  cells/   mL。如細胞生長慢，可離心上清， 留 20%條件培養基，加入 80%的 5-10%血清的傳統培養基或其 他無血
清培養基與 FH-293F 培養基 比例為 75:25 的混合培養基，繼續培養；④重復步驟
③逐步增加FH-293F 所占的比例(5-10%血清的傳統培養基或其他無血清培養基與 FH-293F 的比例為 25:75 至 10:90)直到 100%的 UP1000 無血清培養基；
⑤經過在 100%的 FH-293F 無血清培養基中的幾次傳代培養， 傳代后 3-4 天細胞的密度可以達 到 2-3×10 6    cells/mL，細胞活率大于 90%，這說明細胞已經完全適應了FH-293F 無血清培養基。 之后進行細胞的傳代培養時，細胞的起始密度可以降到 0.3×10 6 cells/mL，一般傳代 2-3 次后 再進行轉染實驗。
注意: 一般細胞馴化過程中，前三代細胞的狀態可能不是很好，但一般從第四代狀態會有改 善。

細胞傳代
1)取細胞培養樣品，人工或儀器測定細胞密度以及活率；
2)計算傳代所需的細胞用量，建議起始細胞密度為 0.2-0.4×10 6  cells/mL。建議復蘇的 細胞至少培養兩代后再用于其他用途。傳代培養體積建議為 15-20 mL(100 mL 的培養瓶)或 50-60 mL (250 mL 的培養瓶)；
3)將細胞置于 37℃，5%CO2，轉速為 110-175 rpm 的恒溫搖床中進行培養，3-4 天傳代一次。
細胞轉染在 FH-293F 無血清培養基中， 采用商業化轉染試劑(例如 Gibco 293Fectin™ ExpiFectamine™ 293 Transfection Kit )  可以實現對 HEK293 細胞的高效轉染。