HepG2 /  細胞介紹

HepG2細胞是來源于一個15歲白人的肝癌組織；分泌多種血漿蛋白：清蛋白、α2-巨球蛋白、血纖維蛋白溶酶原、轉鐵蛋白等；模式染色體數為55；該細胞在免疫抑制小鼠中不致瘤；是一個合適的轉染宿主；表達標志物包括胰島素受體；胰島素樣生長因子II（IGF II）受體。

 

HepG2可以分泌多種血漿蛋白，主要用于肝癌的實驗研究�？梢匝芯考毎�的增殖活性、凋亡能力、對藥物的反應等情況，也可以將HepG2細胞種植在小白鼠或大鼠的體內形成人工的肝細胞癌，之后用藥物來治療這種人工的肝細胞癌，觀察用藥治療的效果。

 

名稱	HepG2（人肝癌細胞）
形態	上皮樣
生長特性	貼壁；傳代比例 1:4 -1:6
營養體系	MEM(C3050-0500) + 10% FBS(C04002)

HepG2

人肝癌細胞

 

 

HepG2 /  細胞復蘇

1. 配制完全培養基：基礎培養基+胎牛血清+雙抗（特殊培養基特殊配置）；

2. 細胞復蘇：取5ml完全培養基于15ml離心管中，37℃水浴鍋預熱，從液氮罐（或者-80℃冰箱）中快速取出凍存的細胞，放入37℃水浴鍋中，搖晃使快速化凍（1min左右），然后將化凍的細胞和預熱的培養基，移入超凈工作臺中，化凍的細胞加入到含預熱培養基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3. 吸棄上清，得到細胞沉淀，用2ml完全培養基輕輕重懸細胞，加入到T25培養瓶中，做好標記，放入37℃，5%CO₂飽和適度培養箱中培養（培養皿復蘇效果更好）；

4. 24h后，觀察細胞貼壁情況（未貼壁的即為死細胞--針對貼壁細胞），吸棄舊培養基，加入新鮮的預熱（室溫或37℃）的完全培養基，繼續培養。

 

 

HepG2 /  細胞傳代

細胞一般是3、4天傳代一次。若是長時間該換液不換液或者不傳代也換液就容易導致細胞漂浮死亡吸去培養液。用PBS輕微沖洗一遍，加入不含EDTA的0.25%胰酶，放置在37℃的培養箱中，2分鐘，即可輕松吹打下來。再放入1.5ml錐型離心管中，800轉每分鐘，離心3分鐘，目的是除去細胞碎片等其他雜質，使細胞更加干凈。后將離心管中上清液吸出，只留下沉淀，再加入新鮮的完全培養基，吹打均勻后加入到細胞瓶中或者平皿中。

 

 

HepG2 /  細胞凍存

1. 90%血清+10%細胞培養級別的DMSO，先放入凍存盒中12小時至24小時。

2. 后轉移到液氮當中。如沒有凍存盒，則需要將細胞放入4℃冰箱中12小時左右。

3. 再轉移至-20℃12小時左右，再轉移到-80℃后12小時左右，最后放入液氮。

 

 

HepG2

細胞狀態好的形態學表現有哪些？

細胞狀態好的特點：細胞克隆成島狀，背景干凈

 

 

HepG2

傳代時，怎樣才能使HepG2消化成單個細胞？

長勢良好的HepG2

 

原因推斷：HepG2在體外培養時容易聚團呈島狀，且如果長得過滿，輕度消化就成片下來，容易成團。

 

解決辦法：

1. 融合率達到80%即可傳代，長太滿容易成片脫落。

2. 先用胰酶消化約3分鐘，用完培終止消化作用，然后用移液管將細胞懸液吸起，將管口稍微用力按在培養瓶底部，用力快速將細胞懸液擠出（可重復一次），可有效減輕細胞聚團。

 

 

HepG2

細胞主要用于哪些實驗研究？

肝炎病毒研究：HepG2是常用的研究HBV和HCV細胞系模型，利用CRISPR/Cas9構建基因敲除HepG2的HBV感染細胞模型細胞，為徹底治愈乙肝提供新思路。

 

體外肝癌（HCC）模型：HepG2中p53抑癌基因無突變，因此可用于研究p53與肝細胞癌（HCC）的密切關系，以及HCC的發病、診治、預防。

 

藥物研究：肝臟是人體內藥物代謝的最主要器官，也是重要的解毒器官。HepG2細胞系無論在形態上還是功能上都更接近于人的肝組織，該細胞系常用于藥物代謝和肝毒性研究。

 

 

注：本文部分內容來源于網絡，僅做學習參考使用。

 

 

 

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