為進一步提高感染性疾病相關個體化醫學檢測，2017年12月1日，國家衛計委發布了最新版的感染性疾病相關個體化醫學分子檢測技術指南。新版的感染性疾病個體化醫學分子檢測技術指南更側重在分子診斷層面，涉及到標本的采集，運輸，保存，實驗室設計，分子診斷方法介紹，試劑的選擇，設備的維護和校準，質控品，結果報告，醫患溝通等全過程，給現今如火如荼的分子診斷檢測有一定的標桿作用，是行業的重要參考，有諸多的更新點。

乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、結核分枝桿菌和人類免疫缺陷病毒是目前個體化醫學檢測開展最廣泛的病原體，分子檢測主要包括病毒載量、耐藥檢測、基因型分型和相關人類基因多態性等。其中乙型肝炎病毒感染的分子診斷要點如下：

要點一：HBV DNA定量檢測

實時熒光定量PCR技術是目前HBV DNA載量檢測的主要方法，具有較高的靈敏度和較廣的線性范圍。核苷類似物治療患者：在治療12周時檢測HBV DNA水平以確定發生病毒性應答，之后每12-24周監測1次。

要點二：HBV基因突變與耐藥

⑴ 與拉米夫定耐藥相關的變異：

拉米夫定與HBV DNA多聚酶YMDD序列結合，起到抑制病毒復制、降低HBV DNA水平的作用。HBV對拉米夫定最常見的耐藥變異就是YMDD變異。病毒出現變異耐藥后，應根據患者的個體情況改用其它抗病毒藥物治療，如干擾素及其它核苷類藥物。

⑵ 與阿德福韋酯耐藥相關的變異：

在長期接受阿德福韋酯治療的病例中發現的耐藥變異為N236T或A181V，但其發生率很低。所有拉米夫定耐藥株對阿德福韋酯均敏感，而阿德福韋酯耐藥株對拉米夫定也敏感。

(3) 與恩替卡韋耐藥相關的變異：

恩替卡韋可抑制拉米夫定耐藥病毒株的復制，但拉米夫定耐藥株對恩替卡韋敏感性低于野毒株，并且容易發生對恩替卡韋的耐藥。目前研究結果顯示，產生恩替卡韋耐藥性的先決條件是需要有拉米夫定耐藥變異。在拉米夫定耐藥變異株上，I169T、184A/G/I/S、S202G/I或M250V變異的出現，可形成對恩替卡韋的耐藥性。

⑷ 與替比夫定耐藥相關的變異：

替比夫定的耐藥屏障低，在基線病毒水平高和治療24周后仍能檢測到病毒的患者中，病毒耐藥發生率高。

要點三：常用的檢測方法

✔序列分析（測序法）DNA序列分析是檢測基因突變最直接可信的方法，是所有其他檢測變異技術的基礎。

DNA序列分析（Sanger測序）測序原理非常科學，過程縝密，結果真實可視，準確率達99.99%，不需要建庫，屬于直接測序，直接讀取數據，連續讀取目標片段，而不是針對某個位點，不需要推導結論，數據充分可信，是分子診斷領域的金標準。

✔實時熒光PCR技術，能計算突變株比例，是檢測慢性乙肝患者拉米夫定耐藥的有效手段。

✔微陣列技術，一種高通量的檢測新技術，具有大通量、快速、靈敏的優勢，但有一定的假陽性和假陰性率，不能檢測出新位點的變異。

✔其他如質譜技術，也可檢測目前我國臨床使用核苷酸藥物耐藥。

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乙肝病毒耐藥和分型檢測（Sanger測序法）
 

• 檢測常見的YMDD突變M204V/I，也可以同時獲得RT逆轉錄區的其他多個耐藥突變位點，包括有文獻支持的A181V/T，N236T，I169T，L180M，T184A/G/S/I/L/F，S202G/I，M250V/L/I，V173L，A194T，對未知耐藥位點和發生變異的病毒有很好的臨床和科研參考價值
• 檢測六種主要乙肝藥物（拉米夫定，替比夫定，恩替卡韋，恩曲他濱，阿德福韋和替諾福韋）的耐藥以及乙肝病毒分型信息
• 分子診斷技術金標準，耐藥和分型一步到位
• 國內唯一獲得CFDA的Sanger測序法的乙肝耐藥分析檢測
• CFDA注冊證：國食藥監械（準）字2014第3401444號