小鼠核因子κBelisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)
瀏覽次數(shù):240 發(fā)布日期:2021-7-28
來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
小鼠核因子κBelisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5. 底物請(qǐng)避光保存。
6. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
9.如需代測(cè)或者樣本暫時(shí)不測(cè)定,可立即低溫凍存,溫度越低越好,中間避免反復(fù)凍融,-20℃以下可保存三個(gè)月,-70℃以下可保存六個(gè)月。
10.試劑使用須知:
11.(1)請(qǐng)參照相關(guān)法規(guī)、文獻(xiàn)、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進(jìn)行安全操作。
12.(2)通常購(gòu)買(mǎi)試劑時(shí)一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
13.(3)萬(wàn)一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作。對(duì)于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。
14.(4)購(gòu)買(mǎi)后,請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng);做好預(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng),做好必要的安全對(duì)策;對(duì)沒(méi)有標(biāo)明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進(jìn)行操作;必須帶好防護(hù)用具,小心翼翼進(jìn)行操作。
實(shí)驗(yàn)用途】核因子κB(NF-Kb),是一種蛋白質(zhì)分子,其結(jié)構(gòu)為一種體內(nèi)的生物誘導(dǎo)分子(biological trigger),是在體內(nèi)許多疾病的生理作用上扮演了重要的角色,從癌癥到骨質(zhì)疏松癥,再到細(xì)菌感染,皆與之脫離不了關(guān)系,NF-kB發(fā)現(xiàn)與哺乳動(dòng)物的細(xì)胞,平時(shí)結(jié)合與另一分子--IkB,IkB使得NF-kB分子失去生物活性,當(dāng)一組啟動(dòng)信號(hào)啟動(dòng)NF-kB后,IkB脫離NF-kB,NF-kB恢復(fù)活性,進(jìn)入細(xì)胞核。NF-kB位于TLR下游信號(hào)通路的樞紐位置,當(dāng)細(xì)胞受到生物應(yīng)激刺激后激活NF-kB,活化的NF-kB進(jìn)入細(xì)胞核調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞因子的表達(dá),啟動(dòng)針對(duì)病原微生物的固有免疫和獲得性免疫。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biNFκBin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過(guò)PBS或TBS的徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。