WB，蛋白質印跡(Western blotting)又稱免疫印跡(immunoblotting)，是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術，具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。

轉膜（Transmembran）是將電泳后分離的蛋白質轉移到固相載體（PVDF膜或NC膜）上的過程。通常有兩種方法，毛細管印跡法和電泳印跡法，常用的電泳印跡法有濕轉和半干轉兩種。兩者基本原理相同，只是在用于固定膠/膜疊層和施加電場的裝置不同。近些年，有些公司也推出了快速轉膜的儀器，有的也得到了一部分用戶的認可。這些轉膜方法各有什么優缺點，我們將從多方面分析一下。

濕轉
 

濕轉是將膠/膜疊層裝置浸入緩沖液中，在膠/膜疊層的兩側加電場，電流會從膠/膜疊層中穿過，使帶電的蛋白在電流的作用下轉移到膜上。電流除了從膠/膜疊層穿過，還可以從緩沖液的其他區域流過，加上膠/膜疊層的電阻也比其他區域的電阻大，大部分電流優先從沒有膠/膜疊層區域的緩沖液中流過，也就是說作用到膠/膜疊層的有效電流是很少的。再者，隨著轉膜時間的增加，緩沖液中的有效離子的濃度也會不斷地降低，表現為恒流轉膜時，電壓會不斷上升，恒壓轉膜時，電流會不斷降低。這就導致了濕轉的時間很長，一般在1-2個小時，但是慢也導致了結果的均勻和穩定。

半干轉

 
半干轉是用浸滿轉膜緩沖液的濾紙夾住膠/膜疊層裝置，組成三明治結構，在這個三明治結構的兩側加上電極，形成電場。這時電場只作用在三明治結構上，因為三明治結構周圍沒有緩沖液，所以電流不會側漏。幾乎所有的電流都經過了膠/膜疊層，所以半干轉的效率很高，速度很快，一般在半小時以內。但是，由于半干轉用到的緩沖液很少，只有兩側濾紙浸入的一些緩沖液，這就導致了半干轉緩沖液中有效離子的濃度衰減很快，可能幾分鐘后，它的有效離子已經消耗殆盡，這時大分子量的蛋白還沒有完全轉到膜上，如果再增加轉膜時間也是無濟于事的。半干轉還有個問題就是產熱，由于它沒有足夠的緩沖液來降溫，導致它的熱量很難散掉。

快速轉膜
近些年出現的快速轉膜基本上都是在轉膜試劑上做一些優化，使轉膜時的電流增大；加大電壓或電流等策略來實現快速轉膜的目的，有的電流能達到1-2A。這種方法沒有從根本上解決上面濕轉和半干轉，電流側漏、有效離子濃度衰減，產熱等問題，大電流還增加了燒膜的風險。

中科通儀M-Blot快速轉膜儀
 
 

中科通儀自主研發生產的專利產品M-Blot快速轉膜儀是濕轉和半干轉的結合，從根本上解決了傳統濕轉和半干轉的一些問題。

M-Blot快速轉膜儀是在半干轉裝置的基礎上增加持續補充轉膜緩沖液的功能，使三明治結構處于一個濕轉的環境中，這時它既有濕轉的均勻和穩定，又有半干轉的效率。它有以下特點。
1.新 新型濕轉，轉膜過程中緩沖液每一秒都是新的，持續補充有效離子。
2.快 轉膜過程只需10-15分鐘。
3.省 節省試劑，單次只需100ml。
4.通 試劑開放，專用試劑效果更佳。
5.穩 恒壓轉膜，電流也穩定，高重現性。
6.冰 新緩沖液的補充同時也帶來了更低的溫度。
7.染 不止有轉膜，它還可以染色。
8.簡 全觸屏操作，簡單方便。
 
歡迎在南京中科通儀科技有限公司官網了解詳情www.zktony.com。