產(chǎn)品簡稱:  PEDV elisa酶聯(lián)免疫試劑盒 
英文名稱： Porcine epidemic diarrhea virus antibody,PEDV ELISA Kit
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
包裝：液體盒裝（48T/96T）
貯藏：2—8°C，避光防潮保存。
有效期：6個(gè)月

檢測中樣品的處理
．細(xì)胞培養(yǎng)物上清：細(xì)胞培養(yǎng)物于室溫000g，離心0分鐘后收集上清，并將標(biāo)本保存于-20℃，且應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．血清：標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于000g，4℃離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)��?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3．血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,000g離心5分鐘，或?qū)��?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4．尿液：無菌收集取初尿，離心除去沉淀物，即可用于檢測，要長期保存尿樣，可以加入0.05％的NaN3在4-8℃保存，或加入尿樣冰凍保護(hù)液放入-20℃冰箱長期保存。
5．組織勻漿：將組織標(biāo)本先用PBS洗滌，除去多余血液，勻漿化后放在PBS于-20℃放置過夜，再經(jīng)過二次反復(fù)凍融破膜，5000g，4℃離心5分鐘，取上清即可檢測。注：取樣和樣品處理過程中，防止有毒物質(zhì)對操作人員的危害，要采取相應(yīng)的保護(hù)措施。

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒(間接法)
() 抗原包被：用包被液將PEDV抗原作∶5稀釋包被反應(yīng)板，每孔00μl，同時(shí)設(shè)陰性細(xì)胞培養(yǎng)物對照孔，置4℃過夜。
(2) 洗滌：用洗滌液洗滌2次，每次2min，瀝干。
(3) 加入被檢血清：用保溫液將被檢血清作∶00稀釋，加入反應(yīng)板相鄰的兩個(gè)孔中，每孔00μl。同時(shí)作陰、陽性標(biāo)準(zhǔn)血清對照，置37℃孵育h。
(4) 洗滌3次：方法同上。
(5) 加入酶結(jié)合物：用保溫液將酶結(jié)合物作∶4 000稀釋，加入反應(yīng)孔中，每孔00μl，置37℃孵育h。
(6) 洗滌3次：方法同上。
(7) 加入底物：每孔00μl，置室溫暗盒內(nèi)顯色20min。
(8) 加入終止液：每孔50μl，靜置5min。
(9) 測定OD值：用檢測儀，于492nm波長，按儀器使用及制定標(biāo)準(zhǔn)要求調(diào)節(jié)儀器，測定各反應(yīng)孔的OD值，記錄結(jié)果。

注意事項(xiàng)：
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡5-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
底物請避光保存。
嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
本試劑不同批號組分不得混用。
0. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。

計(jì)算：
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。