培 養 基

培養基是用來供給細胞營養，促使細胞增殖，也是細胞賴以生長的環境。

細胞培養實驗中用量最多的就是細胞培養基，雖然細胞培養實驗基本技術大同小異，但是每種細胞的培養條件卻相差甚遠。若偏離某種細胞所需的培養條件，則會導致細胞表達不同的表型。

培養基按照來源分類：在動物細胞體外培養實驗中，可使用天然培養基（Natural Medium）或是合成培養基（Synthetic/Artificial Medium）。

天然培養基

源于動物體液或組織分離提取，營養成分豐富且各項條件與體內環境相似，所以培養效果佳，但是由于來源于動物，成分復雜，且批間差較大。

合成培養基

是由高純度化學成分（無機鹽、氨基酸、維生素、含碳物質等）與純水配制而成，所有成分都是確定且可知其確切含量的。合成培養基根據實驗目的又可分為三種：

• 短時間保存細胞活性

  即各類平衡鹽溶液，具有特定的pH和滲透壓；能維持細胞離開生物體后幾小時內的活性。

• 延長細胞存活時間

  即基礎培養基，在平衡鹽溶液中添加各種有機化合物或血清，配合適當的實驗操作條件，可將細胞培養至多代。

• 特殊功能

  即特殊培養基，根據實驗目的-誘導分化、增殖等要求，將基礎培養基額外添加各類因子的特殊培養基。

目前，合成培養基憑借成分明確且種類繁多等特點和優勢占據市場主導地位，也是研究人員的首要選擇。

合成培養基成分與功能

培養基一般含有氨基酸、無機鹽、維生素、含碳物質和其他營養元素，每種成分對于細胞存活、代謝等功能都有不同影響，不同細胞系需要的成分含量也不同，因此市面上會存在各類培養基配方。

因培養基種類繁多，因而，我們只簡單列舉了幾種常見基礎培養基為大家進行介紹。

01 DMEM

Dulbecco's Modified Eagle Medium（DMEM）是目前最常使用的改良式Eagle's培養基。DMEM與MEM含有相同的營養成分，但濃度高出2~4倍。主要用于快速生長的細胞，分低糖（1000 mg/L）、高糖（4500 mg/L）兩種。DMEM含更高濃度的NaHCO₃，要用10%的CO₂來平衡，當然也可以在較低CO₂濃度下使用。

DMEM-高糖（標準型）更適合高密度懸浮細胞培養。適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養。 

DMEM-低糖（標準型）適于依賴性貼壁細胞培養，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養。

02 RPMI-1640

RPMI-1640營養成分比較簡單，比DMEM少一點糖和谷光甘肽，廣泛應用于許多種正常細胞和腫瘤細胞、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。

03 DMEM/F12

F12培養基成分豐富，含有多種微量元素，和DMEM以1:1結合，稱為DMEM/F12培養基，作為無血清培養基的基礎，利用了F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養成分為優點。

該培養基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養。為了增強該培養基的緩沖能力，可以在DMEM/F12（1:1）中加入15 mM HEPES緩沖液。

04 McCoy's 5A

McCoy's 5A Medium最早是用于肉瘤細胞的培養所設計，可支持多種（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代細胞的生長。除適于一般的原代細胞培養外，主要用于作組織活檢培養、一些淋巴細胞培養以及一些難培養細胞的生長支持。

05 M-199

M-199培養基由Morgan等人研制，是第一個具有確定化學成分的細胞培養液，原本是用來研究雞胚原代細胞。除BSS（平衡鹽溶液）外，含有53種成分，為全面培養基，此培養液必須輔以血清才能支持長期培養。主要用于雞胚成纖維細胞培養。M-199可用于培養多種種屬來源的細胞，并能培養轉染的細胞，廣泛用于病毒學、疫苗生產。

06 MEM

Minimal Essential Medium是最基本的培養基, 設計之初是為了培養HeLa細胞以及部分哺乳類的成纖維細胞。MEM含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素，適合多種細胞單層生長。以MEM為基礎，Stanner利用Earle's Balanced Salts和非必需胺基酸（NEAA）進一步配制成MEM-Alpha培養基，可廣泛用于哺乳動物細胞的培養。

好啦，本期介紹就到這里了

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