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單細胞分離與孔板成像組合的高效細胞株開發流程

瀏覽次數:1815 發布日期:2020-6-11  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

 

細胞活率低?實驗效率低?新方式助力細胞株開發

 

在生物藥物分子?(如抗體)?的生產過程中細胞株開發及單克隆性確認是非常關鍵的步驟。細胞株開發起于將表達目的蛋白的基因轉入宿主細胞。通過分離高效表達目的蛋白的單個活細胞即可建立細胞株。在這個過程中,單克隆性的記錄至關重要,用于確保細胞株的基因重現性。隨后的步驟涉及細胞克隆的產量、質量和穩定性的表征?(如下圖)。

 

細胞株開發的典型工作流程

當前細胞株開發的工作流程有一些局限,如低細胞活率、低效的單細胞分離以及有限的單克隆性證據。有限稀釋,一種傳統分離單細胞的方法,依賴于統計概率,無法提供單克隆性的可視化證據。此外,該技術的效率非常低,最終導致每塊微孔板上可供篩選的克隆非常少。

 

CloneSelectTM高通量單細胞分離系統是一個新穎的臺式設備用于柔和精確地從液體樣品中分離出單個活細胞。單細胞分離系統采用微流控分離槽以精確地分離單個細胞,同時最小化分離不同細胞可能帶來的交叉污染的風險。當單細胞分離系統與?CloneSelectTMImager?(CSI)?細胞生長分析系統的快速成像技術配合,可以顯著提高細胞株開發流程的效率。

 

CloneSelectTM單細胞分離系統的技術原理

 

本篇應用文章我們將介紹結合單細胞接種和單克隆性驗證的工作流程。我們利用單細胞分離系統和CSI接種單細胞至微孔板,然后確認這些細胞的存在并記錄他們在隨后幾天里的生長過程。最后,我們將介紹如何生成包含單克隆性證據的文件用于提交監管機構審批。

 

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