鈣指示劑在GPCR和鈣離子通道功能分析的應用
將所有的鈣離子綠色熒光探針放在一起，它們的激發發射光線有多大差異？哪款產品的相對亮度更高？細胞內保留時間更長？細胞加載時間更短？AAT Bioquest最亮的綠色鈣離子熒光探針的性能如何？感興趣的朋友一起來看看吧！
綠色鈣離子熒光探針的比較
| 產品名稱 | Ex/Em(nm) | (信號背景比)S/B | 相對亮度 | 細胞內保留 | 加載時間 | 其他 |
| Fluo-3 | 506/526 | 2 | 50 | 相比最低 | 1 h | 在相同條件下，Calbryte探針的亮度明顯更高 |
| Fluo-4 | 494/516 | 4.5 | 100 | 低 | 1 h | |
| Fluo-8 | 490/514 | 4.5 | ~200 | 低 | 0.5-1 h | |
| Cal-520 | 492/514 | 9.0 | ~150 | 高 | 1-2 h | |
| Calbryte-520 | 490/514 | 10.0 | ~350 | 高 | 0.5-1 h |
Calbryte-520的主要功能：
1.異常明亮
2.在細胞中比Fluo-3和Fluo-4大大提高了信噪比
3.明顯增強的細胞內保留（減少甚至消除了丙磺舒的使用）
4.更快的細胞加載
圖1.各種綠色鈣離子熒光指示劑對比圖。
Calbryte 520與市售的其他綠色鈣離子指示劑的各類數據對比
內源性Gq的鈣含量測定---Calbryte 520 vs. Fluo-4
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圖2.用熒光顯微鏡ATP誘導CHO-K1細胞內源性P2Y受體反應。Calbryte 染料產生更亮的信號，更高的信噪比，并大大增強了細胞保留能力。
外源Gq的鈣含量測定---Calbryte 520 vs. Fluo-4
Calbryte 520無丙磺舒免洗試劑盒與FLIPR Calcium 4檢測試劑盒數據分析
圖3.CHO-K1細胞中內源性P2Y受體對ATP的熒光信號響應的比較。 將CHO-K1細胞以50,000個細胞/ 100 µL /孔在黑色96孔板中接種過夜。 使用Screen Quest Calbryte 520無丙磺舒和免洗的鈣測定試劑盒（紅色），FLIPR鈣4測定試劑盒（藍色）和Fluo-4直接鈣測定試劑盒（綠色）測量鈣通量響應。 FlexStation 3添加了ATP（50 µL /孔）以達到最終指示的濃度。
Calbryte 520和Fluo-4在GPCR（Gi）靶向難標記受體中的應用數據對比
圖4.Rantes在Flexstation中刺激了趨化因子受體5（CCR5）瞬時轉染的CHO細胞（Cat＃38105）中的鈣反應(注：上方，深綠色線條為Calbryte 520；下方，淺綠色線條為Fluo-4)
Calbryte 520與GPCR（Gi）目標間接cAMP檢測的應用
圖5.嵌合G蛋白（Gqi，Gqo，Gqs，Gqz）或混雜G蛋白（Gα16）可以與Gi，Go或Gs蛋白偶聯受體結合，產生外源性細胞內鈣信號。 |
圖6.使用Calbryte-520 PBX NW試劑盒（#36318）在CHO-Ga16-NOP細胞（#38100）中測量了傷害感受肽刺激的鈣反應。 |
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