β‑瓊膠酶因的制備方法步驟
瀏覽次數:192 發布日期:2020-3-24
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1.一種β-瓊膠酶,其氨基酸序列如序列表中SEQIDNO:1所示。2.一種β-瓊膠酶基因,編碼權利要求1所述的β-瓊膠酶,其核苷酸序列如序列表中SEQIDNO:2所示。3.權利要求2所述β-瓊膠酶基因的制備方法,包括以下步驟:以檸檬假交替單胞菌PseudoalteromonascitreaYTW1-15-1的基因組DNA為模板,在上游引物、下游引物的作用下進行PCR反應;PCR反應結束后,對PCR產物進行電泳,切膠回收產物,即得到所述的β-瓊膠酶基因。4.根據權利要求3所述的制備方法,其特征在于:所述的上游引物為5’-CGCGGATCCGCAGATTGGGACGCATATAG-3’,所述的下游引物為5’-CCGCTCGAGTTAGTTTGCTTTGTAAACACG-3’。5.一種β-瓊膠酶基因重組載體,由權利要求2所述的β-瓊膠酶基因與表達載體pET28a(+)構建而成。6.權利要求5所述β-瓊膠酶基因重組載體的制備方法,包括以下步驟:1)取權利要求2所述的β-瓊膠酶基因與pMD19T載體連接,構建β-瓊膠酶基因克隆載...
技術保護點
一種β‑瓊膠酶,其氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。
一種β‑瓊膠酶及其編碼基因和應用,所述β‑瓊膠酶的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,所述β‑瓊膠酶的編碼基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。本發明專利技術所述的β‑瓊膠酶,具有良好的熱穩定性和酶活性,能夠特異性降解瓊脂糖,產生單一的終產物新瓊四糖,為瓊膠寡糖的制備提供了新的酶源。