Azure Biosystems 國立首爾大學化學系CRI化學蛋白組學Wan Gi Byun團隊在《Chembiochem》發表了他們最新的研究成果，基于熒光的緊密結合分析發現了一種蛋白質-RNA相互作用的小分子調節劑。
那為什么要研究RNA-蛋白之間的相互作用呢？
RNA和蛋白是可以相互作用的生物分子，可以通過物理性相互作用，調節彼此的生命周期和功能。mRNA編碼序列指導蛋白質和一些調節序列的合成，而mRNA的非翻譯區域通過調控蛋白質的翻譯、定位和與其他蛋白質的相互作用，影響編碼蛋白的命運。另一方面，從RNA合成到降解的過程中，蛋白質反過來可以結合和調控RNA的表達和功能。RNA與蛋白質的相互作用對于維持細胞穩態是非常重要的，而干擾兩者的相互作用會造成細胞功能失調和相關疾病的發生。
那如何來檢測蛋白-RNA間的相互作用呢？
讓我們一起來看看Wan Gi Byun團隊是怎么做的： 蛋白質結合會引起微環境的變化，而這將會顯著改變與之結合的核酸偶聯的熒光基團的熒光強度。鑒于此，Wan Gi Byun團隊構建了一種簡單而強大的分析方法來檢測let-7 miRNA及其轉錄后調控蛋白Lin28之間的相互作用。通過熒光EMSA來確定化合物的活性以及IC50，測定熒光結合強度后，經4%丙烯酰胺凝膠電泳后，使用Azure Sapphire對Cy3和TAMRA以及Cy5的熒光信號進行可視化檢測。
 
  Figure 3. Hit identification and validation (a) Chemical structure of hit compounds. (b) Dose-response curve obtained by fluorescence intensitybased binding assay. Error bars represent the standard deviation from three independent measurements. (c) Hit validation by EMSA.
此外，通過Western Blot來檢測下游信號通路蛋白的含量變化。
僅需一臺Sapphire即可完成EMSA和Western Blot的檢測，Sapphire的功能絕不僅限于此…… Sapphire是市面上唯一可以進行掃描式和CCD成像化學發光的雙模式成像系統，也是唯一使用3種檢測器檢測信號的成像系統（APD，PMT，CCD），具有更寬的動態范圍，靈敏度更高，分辨率可達10-1000微米。
Sapphire除了完成Paper中使用的EMSA凝膠阻滯實驗外，還能完成哪些實驗呢？
可以完成DNA/Protein凝膠成像，Western Blot化學發光，多通道熒光檢測， in-cell western檢測，2D和2D-DIGE以及磷屏成像檢測…… 看到這里，您對Azure Biosystems是不是更加了解了呢？是不是也想試用一下呢？那就趕緊搜索“北京深藍云生物科技”來聯系我們吧！