酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)核小體測定
瀏覽次數(shù):270 發(fā)布日期:2019-11-12
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人體內(nèi)的細(xì)胞注定是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡則是病理性的,有關(guān)細(xì)胞死亡過程的研究,已成為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究的一個熱點,身為一位科研工作者,對細(xì)胞凋亡的幾種檢測方法都應(yīng)該有所了解!
酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)核小體測定
凋亡細(xì)胞的DNA斷裂使細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)核小體。核小體由組蛋白及其伴隨的DNA的片斷組成,可由ELISA法檢測。
、檢測步驟
.將凋亡細(xì)胞裂解后高速離心,其上清液中含有核小體;
.2、在微定量板上吸附組蛋白體;
.3、加上清夜使抗組蛋白抗體與核小體上的組蛋白結(jié)合;
.4、加辣過氧化物酶標(biāo)記的抗DNA抗體使之與核小體上的DNA結(jié)合;
.5、加酶的底物,測光吸收制。
2、用途
該法敏感性高,可檢測5*00/ml凋亡細(xì)胞。可用于人、大鼠、小鼠的凋亡檢測。該法不需要特殊儀器,適合基層工作,但是不能測定凋亡細(xì)胞發(fā)生的絕多對量。