數碼液相芯片技術的原理和應用
瀏覽次數:6651 發布日期:2019-1-2
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液相芯片概念
液相芯片,也稱為微球體懸浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于微球編碼技術的新型生物芯片技術平臺,它是在不同編碼的微球上進行抗原抗體、酶底物、配體受體的結合反應及核酸雜交反應,通過兩束不同的激光分別檢測微球編碼和報告熒光來達到定性和定量的目的,一個反應孔內可以完成多達100多種不同的生物學反應。
目前的微球編碼技術主要有熒光編碼及Applied BioCode最新一代的專利數字化數碼編碼技術(Barcoded Magnetic Beads,BMB),而后者由于不受熒光物質影響,是完全數字化的生物數碼編碼技術,具有更精準的識別能力并且能做到一次檢測4096個數碼粒子指標,是對液相芯片技術一個革命性的進步。
原理
檢測時先后加入樣品和報告分子與標記粒子反應,樣品中的目的分子(待檢測的抗原或抗體、生物素標記的靶核酸片段、酶等)能夠與探針和報告分子特異性結合,使交聯探針的粒子攜帶上報告分子藻紅蛋白,隨后利用儀器(如BioCode 2500)對數碼粒子進行檢測和結果分析。BioCode 2500采用CCD快速成像的方式來進行檢測,使用白色LED光源識別數碼芯片的數字化編碼,使用紅色LED光源分別對單個粒子上的報告分子上的報告熒光進行檢測。白色LED光源可將粒子分類,從而鑒定各個不同的反應類型(即定性);綠色LED光源可確定粒子上結合的報告熒光分子的數量,從而確定粒子上結合的目的分子的數量(即定量),并將兩組CCD快速成像進行疊加,通過軟件進行快速的定性定量分析。因此,通過白色及綠色LED雙光源的同時檢測,完成對反應的實時、定性和定量分析。
液相芯片的主要科研應用
液相芯片是繼平面芯片之后的一種新型芯片技術,是一種非常靈活的多重分析平臺,在核酸、蛋白質等生物大分子的大規模多重分析中具有巨大的應用潛力,可用于免疫分析、核酸研究、酶學分析、受體配體識別分析等眾多領域的研究,蛋白質-蛋白質相互作用、蛋白質核酸相互作用分析等都可以在同一個平臺上實現。鑒于液相芯片技術在高通量定性和定量檢測上令人矚目的優勢,目前它在基因組學研究、蛋白質組學研究、藥物開發、基礎研究和臨床診斷等方面的應用十分廣泛,近幾年來以此為平臺的產品開發和應用十分活躍,研究者既可以根據研究需要自行制備探針交聯微球,建立反應體系,也可使用種類繁多的商品化試劑盒進行分析。大體說來,液相芯片技術的應用包括兩大部分:液相蛋白芯片和液相基因芯片,前者主要是基于抗原抗體反應,而后者實質為核酸雜交。
Applied BioCode數碼磁珠技術簡介
Applied BioCode采用獨特的專利數碼粒子技術(Barcoded Magnetic Beads,BMB)及無液路的CCD檢測技術來實現對可多達4096個指標的多重檢測。
1952年10月7日,第一個數字條形碼專利被授予發明者約瑟夫•伍德蘭和伯納德•西爾弗。幾十年后,第一臺讀取數字條形碼的掃描儀于1974年安裝在俄亥俄州特洛伊市馬什超市。條形碼很快成為行業標準,并成為數百萬種產品識別信息的最廣泛使用的方法。
1995年,條碼標簽被提出用于生物分子識別[WO 96/24061, EP0757830, US 5770455]。所述條碼襯底包括微芯片、硅、二氧化硅或金屬;然而,這些材料缺乏生物相容性,無法成為商業上可行的產品。Applied Biocode公司成立于2008年,并開發出了生物相容性的數碼粒子,它不僅具有良好的物理性能(密度、硬度、溫度、壓力、壽命穩定性)和化學性能(pH穩定性、表面化學、生物功能),而且具有良好的生物相容性(核酸、蛋白質、緩沖液、長期穩定性),公司的研究團隊率先開發了顯微鏡級仿生條碼技術,設計了一個完整的蛋白質和核酸分子條碼和檢測系統。Applied Biocode公司專注于數碼粒子(BMB)技術的生物醫學應用,為研究和臨床實驗室帶來了革命性的新工具。
該數碼粒子經特殊表面處理,可將任何DNA、RNA等核苷酸探針或是抗原、 抗體等蛋白質探針做連接,穩定性達一年以上。粒子為高分子材料夾層和順磁性內層材料,實驗操作方便,芯片可以快速與生物探針反應,粒子具有水平沉降易于判讀的特性,且黑白相間的條形碼判讀準確率近100%。
BioCode 2500數碼液相芯片系統介紹
BioCode 2500數碼液相芯片系統可快速掃描整體96孔微孔板,配合CCD相機,利用明視野影像讀取條形碼進行數碼粒子編碼識別,然后經由讀取熒光訊號強度來量化分析物。
BioCode 2500數碼液相芯片系統使用高性能的光學檢測裝置及強大的數據分析軟件,可以非常精準的識別數碼粒子上的數字條碼信號,以及通過檢測藻紅蛋白的熒光信號強度來對生物標志物進行量化分析。該設備沒有液路系統,大大降低了由于液路堵塞導致的設備故障,從而降低了客戶的設備維護成本。
BioCode 2500數碼液相芯片系統可以在一個樣本中同時獲得數十甚至數百種的檢測結果?蓮V泛應用于傳染病、遺傳性疾病、過敏原、自身免疫、腫瘤、精準醫學、動物檢驗、食品檢驗、遺傳醫學、生命科學研究、基因表達譜、藥物及生物標志物等疾病的檢測和篩選多個領域。