上一篇推文,介紹了WIGGENS的CGQ生物量在線監測系統,在微生物(細胞)效能評價/菌種篩選的應用。
本期介紹生物量監測在微生物(細胞)培養條件優化中的應用。培養基為微生物(細胞)的生長提供環境條件以及碳源,氮源,生長因子等。培養基具有通用性,但每種培養物都有特殊性。在通用培養基的基礎上針對培養物的特性做適當的調整或成分添加,對目的產物的高效產出,具有重要正作用。
下圖是德國法蘭克福歌德大學,使用CGQ生物量監測系統對Saccharomyces cerevisiae (一種釀酒酵母)在不同碳源組分中的生長曲線。
三種碳源Glc(葡萄糖)、Gal(半乳糖)、Mal(酰胺)不同濃度對釀酒酵母的生長有著明顯的影響,對遲緩期和對數期的影響顯著。碳源各組分濃度不同,對釀酒酵母進入平臺期的時間甚至有超過6小時的差距影響。這對注重效率的工業發酵來說,減少遲緩期的時間段,有著重要的參考意義。
下圖是,在M9培養基中,通過加入不同濃度的甘油,Escherichia coli (大腸桿菌)的生長曲線
從上圖大腸桿菌的生長曲線可以看出,在M9培養基中,甘油濃度是對大腸桿菌最終生長量的最大影響因素。0.4%的甘油濃度對比0.1%的甘油濃度,對數生長期有明顯提升,最終得到的生物量也是低濃度甘油的4倍以上。
下圖是通過培養過程的搖瓶補液,CGQ進行的實時生物量監測。
在大腸桿菌培養中,通過LIS搖瓶補液系統,在搖瓶培養過程中進行在線補入緩沖液,緩沖液對pH值進行了調節。在使用LB培養基培養大腸桿菌的過程中,對生物量的限制的最大因素不是培養基組分,而是pH值,持續的進行pH調節,可以有效的增加生物量,提高培養基的利用率。
更多的CGQ生物量監測應用,請參考如下文獻:
[1]Tripp et al (2017):Establishing a yeast-based screening system for discovery of human GLUT5inhibitors and activators (Nature – Scientific Reports)
[2]Bruder, S. &Boles, E. (2017): Improvement of the yeast based (R)-phenylacetylcarbinol productionprocess via reduction of by-product formation (Biochemical EngineeringJournal).
[3]Gottardi et al. (2017):De novo biosynthesis of trans -cinnamicacidderivatives in Saccharomycescerevisiae (AppliedMicrobiology and Biotechnology).
[4]Bracharz et al. (2017):The effects of TORC signal interference on lipogenesis in theoleaginous yeast Trichosporonoleaginosus (BMCBiotechnology).
[5]Bruder et al. (2016):Parallelised onlinebiomass monitoring in shake flasks enables efficient strain and carbon sourcedependent growth characterisation of Saccharomycescerevisia (MicrobialCell Factories).