韩国免费A级作爱片无码_亚洲欧洲精品成人久久av18_亚洲国产成人AV毛片大全_成年人在线免费看的惊悚动作片_一级爽片_爱爱免费

English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個(gè)人登錄 | 郵件訂閱
當(dāng)前位置 > 首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 原代細(xì)胞傳代培養(yǎng)

原代細(xì)胞傳代培養(yǎng)

瀏覽次數(shù):3720 發(fā)布日期:2018-8-14  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,傳代是非常重要的環(huán)節(jié),若操作不當(dāng)會(huì)給細(xì)胞帶來(lái)不可逆轉(zhuǎn)的傷害,原代細(xì)胞因其培養(yǎng)難度高且傳代次數(shù)有限,細(xì)胞消化的步驟需要格外細(xì)心與謹(jǐn)慎。美國(guó)ScienCell公司根據(jù)其豐富的原代細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),總結(jié)出一套細(xì)胞消化的方法,有效降低了消化步驟對(duì)細(xì)胞的操作。現(xiàn)分享給大家:

1. 當(dāng)細(xì)胞達(dá)到80-90%融合時(shí)需要傳代培養(yǎng)。

2. 提前準(zhǔn)備好多聚賴氨酸(PLL,貨號(hào)0403纖維粘連蛋白(BPF,貨號(hào)8248)包被好的培養(yǎng)瓶。

3. 將完全培養(yǎng)基,胰酶/EDTA消化液(T/E,貨號(hào)0103)胰胰中和液(TNS,貨號(hào)0113)不含鈣鎂離子的DPBS(貨號(hào)0303)加熱至室溫。我們不推薦用37度水浴加熱試劑和培養(yǎng)基。

4. 用DPBS沖洗細(xì)胞。

5. 以T-75培養(yǎng)瓶為例,向培養(yǎng)瓶中加入8mlDPBS,然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶保證細(xì)胞被胰酶/EDTA消化液完全覆蓋。將培養(yǎng)瓶置于37度培養(yǎng)箱1-2分鐘直到細(xì)胞變圓。在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化。

6. 在消化期間,準(zhǔn)備一支50ml離心管加入5ml胎牛血清(FBS,貨號(hào)0500)

7. 將胰酶/EDTA消化液從培養(yǎng)瓶中吸出至50ml離心管中(一小部分細(xì)胞已消化下來(lái)),將培養(yǎng)瓶繼續(xù)置于37度培養(yǎng)箱中1-2分鐘(此時(shí)培養(yǎng)瓶中沒(méi)有液體)。

8. 在孵化結(jié)束時(shí),輕輕拍打培養(yǎng)瓶側(cè)面使細(xì)胞脫離表面。在顯微鏡下檢查以確保所有細(xì)胞已脫離。

9. 向培養(yǎng)瓶中加入5ml胰酶中和液,將消化后的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至50ml離心管中。再加入5ml胰酶中和液沖洗培養(yǎng)瓶,以保證所有細(xì)胞被收集。

10. 在顯微鏡下觀察剩余細(xì)胞數(shù)量以確定是否收集成功,細(xì)胞數(shù)量應(yīng)小于5%。

11. 以1000轉(zhuǎn)/分離心收取的細(xì)胞懸液5分鐘,然后在培養(yǎng)基中重懸細(xì)胞。

12. 細(xì)胞計(jì)數(shù),然后將細(xì)胞以推薦的細(xì)胞密度接種在包被好的培養(yǎng)瓶中。

電話+微信13683626447

發(fā)布者:北京裕恒豐科技有限公司上海分公司
聯(lián)系電話:18211009052
E-mail:3222748508@qq.com

標(biāo)簽: 原代細(xì)胞
用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊(cè) 忘記密碼
評(píng)論只代表網(wǎng)友觀點(diǎn),不代表本站觀點(diǎn)。 請(qǐng)輸入驗(yàn)證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 一级视频在线观看 | 久久国产欧美日韩精品 | 无码人妻丰满熟妇啪啪7774 | 无码熟妇αⅴ人妻又粗又大 | 7777奇米亚洲综合久久 | 亚洲欧美视屏 | 欧美黄视频网站 | 男人把女人桶到喷白浆的软件免费 | 成年免费a级毛片免费看 | 久久做受WWW | 日本久久久久久久久 | 亚洲色图色 | 超碰国产欧美人人 | 精品久久久久香蕉网 | 国内精品久久久久久99 | 99re免费视频精品全部 | 国产精品黄片 | 欧美破苞系列二十三 | 丰满少妇人妻HD高清大乳在线 | 丁香五月亚洲中文字幕 | 久久99精品久久久久久久不卡 | 亚洲日韩一区二区三区 | 色婷婷久久综合中文久久一本 | 伊人久在线观看视频 | 欧洲一区二区三区在线 | 欧美超大胆裸体XX视频 | 国产免费一级 | 少妇被躁爽到高潮无码人狍大战 | 男人激烈吮乳吃奶视频免费 | 91原创在线?看 | 天天草夜夜草 | 亚洲无人区码二码三码区别图 | 精品国产成人网站一区二区 | 欧美人善z0zo性伦交高清 | 国内外精品激情刺激在线 | 国产免费观看AV大片的网站 | 成人午夜看黄在线尤物成人 | 鲁大师在线视频播放免费观看 | 国产国拍精品亚洲A片男同 亚洲av日韩av天堂影片精品 | 亚洲高清无码视频网站在线 | 久久福利av |