如何打一場漂亮的細胞保衛戰？

細胞污染是細胞培養的大敵，預防和避免污染是細胞培養成功的關鍵。一旦輕敵就會前功盡棄，不僅浪費時間，而且浪費人力、物力，甚至造成無法彌補的損失。而且小編的童鞋也經常向我抱怨：每到畢業季，就藍瘦，香菇是因為細胞死了一批又一批，畢業遙遙無期�。∧敲慈绾未蛞粓銎�亮的細胞保衛戰呢？下面就跟隨小編一起來學起來吧~

步：認識細胞培養過程中有哪些污染？

細胞培養污染是指培養環境中侵入了對細胞生存有害的成分和造成細胞變異的異物。體外細胞培養污染可分為三類：物理性、化學性及生物性污染。

物理性污染：

物理性污染通過影響細胞培養體系中的生化成分，從而影響細胞的代謝。

物理性污染的來源：培養環境中的物理因素，如溫度、放射線、振動、輻射（紫外線或熒光）會對細胞產生影響。

物理性污染的現象：細胞、培養液或其他培養試劑暴露在放射線、輻射或過冷過熱的溫度中，可以引起細胞代謝發生改變，如細胞同步化、細胞生長受抑制，甚至細胞死亡。

化學性污染

化學性污染是一些對細胞有毒性的或對細胞產生刺激的化學物質。

化學性污染的來源：

未純化的物質、試劑、水、血清、生長輔助因子及儲存試劑的容器都可能成為化學性污染的來源。細胞培養的必需養分（如氨基酸）若濃度超過了合理的范圍，也會對細胞產生毒性。同樣，不同細胞系在培養條件下對血清和緩沖液的要求是不一樣的，在培養中應嚴格控制。

化學性污染的現象：化學性污染同樣會使細胞生長受抑制，甚至細胞死亡。

生物性污染

生物性污染包括比較容易發現的細菌、霉菌和酵母的污染，和較難發現的病毒、支原體和其他細胞的污染。

生物性污染的來源：

● 取材不慎或處理不當

● 空氣塵埃

● 消毒不嚴

● 操作不當

● 試劑尤其是血清污染

生物性污染的現象：

● 細菌：G+菌較多。

● 真菌：霉菌較多。

● 支原體：不易檢測。

● 病毒：由于病毒有種屬特異性，所以病毒污染的概率比較小。

第二步：做好預防污染措施

針對細胞污染的三個分類，做好如下預防措施：

A.物理性污染的預防

● 實驗室的合理設計及建立規范的操作規程；

● 培養箱應放在恒溫的環境中；

● 培養液及試劑應放在固定位置，而且要注意避光，試劑周圍不能放置同位素；

● 從冰箱中取出的培養液應在室溫條件中放置一段時間后再進行使用，以避免過冷的溫度對細胞的影響。

B.化學性污染的預防

● 使用的物質都應是高純度的，同時正確配制和儲存培養液及試劑。

● 在配制液體和清洗容器時必須使用不含雜質的超純水。

● 選用同一批次的血清。

● 在選用器皿時，根據被培養細胞的生長特性、培養方式和所用培養液的性質來選用適合的器皿來達到實驗的準確性和可靠性。

C.生物性污染的預防

● 建立規范的無菌操作程序及各種規章制度，并嚴格執行。

● 控制環境污染，同時注意實驗人員的防護及無菌服的潔凈和無菌。

● 保證細胞培養基和器材無菌。

● 在細胞培養基中加入適量的抗生素。

預防是防止細胞培養過程中發生污染的辦法。只有提前做好預防工作，才能將發生

污染的可能性降到最小程度。

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