實驗原理

免疫細(xì)胞化學(xué)（immunocytochemistry）是根據(jù)免疫學(xué)原理，利用抗體同特定抗原專一結(jié)合，對抗原進(jìn)行定位測定的技術(shù)。抗原主要為大分子或與大分子相結(jié)合的小分子；抗體則是由漿細(xì)胞針對特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果將抗體結(jié)合上標(biāo)記物，再與組織中的抗原發(fā)生反應(yīng)，即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于組織中的部位。

常用的標(biāo)記物有熒光素和酶。熒光素標(biāo)記的稱為免疫熒光法（immunofluorescent technique），常用的螢光素有異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate）、羅丹明（rhodamine）等。酶標(biāo)記的稱為酶標(biāo)免疫法（enzyme-labeled antibody method），常用的酶有辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase），酶與底物發(fā)生反應(yīng)后形成不透明的沉積物，從而顯示出抗原存在的部位。

抗體與抗原的結(jié)合方法可分為直接法和間接法兩種，直接法是將帶有標(biāo)記的抗體與抗原反應(yīng)，顯示出抗原存在的部位。而間接法則是在抗體抗原初級反應(yīng)的基礎(chǔ)上，再用帶標(biāo)記的次級抗體同初級抗體反應(yīng)，從而使初級反應(yīng)得到放大，顯示增強。

13. 自來水洗，蘇木素淺染細(xì)胞核，分化。自來水沖洗返蘭，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。