QIAGEN-囊泡exosome RNA的完美解決方案
瀏覽次數：1842 發布日期：2015-5-3
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exosome是直徑約為30-150nm的小囊泡，在30年前被人們所發現。exosome天然存在于所有體液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，且其蛋白、RNA和脂肪成分特異，早期的研究認為，exosome執行蛋白運輸功能，特異靶定受體細胞，交換蛋白和脂類或引發下游信號事件。直到2007年，研究人員發現exosome也運輸核酸，參與細胞間通訊。至此，這種小囊泡才被人重視，并成為熱門的研究對象。細胞外微泡， 運載RNA（包括mRNA、miRNA、lncRNA）、DNA及蛋白質，為細胞間信號交流起著重要作用。
QIAGEN exoRNeasy Serum/Plasma Kit改進了傳統的超速離心微泡分離方法，能夠在20分鐘內快速純化得到細胞外囊泡。該試劑盒采用Exosome Diagnostics, Inc.公司的技術，通過離心柱和特制緩沖液，從多達4 ml的預過濾血漿中分離exosomes。之后使用QIAGEN miRNeasy技術分離總RNA。整個實驗流程，從血清/血漿樣本到RNA產物，只需1小時。 |
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性能優勢： |
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| exoRNeasy純化exosomes和其他細胞外微泡與超速離心法相比，不僅速度更快，并且產物純度更高。掃描電鏡顯示，雖然這兩種純化技術都能夠純化預期大小的完整的囊泡，但超速離心法的產物還含有很多不符合預期的更小、或其他形狀的細胞結構。 |
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通過RT-qPCR實驗對exoRNeasy純化的RNA產物和exoEasy分離柱流出液進行分析，結果顯示，exoRNeasy的產物包括血漿中所有mRNA，包括細胞外囊泡的miRNA，且不含細胞。 |
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操作流程 ： |
從細胞外微泡分離RNA的完整實驗包括兩步：純化exosomes和分離RNA。
- 在exosomes純化步驟，預過濾的血漿（不包含大于0.8 μM的微粒）與Buffer XBP混合，加至exoEasay親和性膜離心柱上，結合到柱上。使用Buffer XWP洗滌結合在膜上的囊泡，之后使用QIAzol裂解。
- 在RNA分離步驟，在QIAzol洗脫液中加入氯仿，回收水相，將其與乙醇混合。包括miRNA在內的總RNA結合到離心柱上，洗滌三次后洗脫。
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產品信息 ： |
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——囊泡RNA研究完整解決方案：
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研究方案 |
產品 |
貨號 |
目錄價 |
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純化來自血清/血漿樣本中exosome中的RNA(含miRNA) |
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit (50) |
77064 |
26420 |
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exoRNeasy Serum/Plasma Midi Kit (50) |
77044 |
10560 |
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exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20) |
77023 |
5790 |
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檢測exosome中miRNA產品套裝 |
miScript II RT Kit (12) |
218160 |
1450 |
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miScript Primer Assay (100) |
218300 |
1060 |
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miScript SYBR Green PCR Kit (200) |
218073 |
5380 |
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miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control |
219610 |
560 |
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檢測exosome中lncRNA產品套裝 |
RT² First Strand Kit (12) |
330401 |
2640 |
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RT² lncRNA qPCR Assay (200) |
330701 |
1590 |
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QuantiNova SYBR Green PCR Kit (500) |
208054 |
2880 |
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檢測exosome中mRNA產品套裝 |
RT² First Strand Kit (12) |
330401 |
2640 |
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QuantiTect® Primer Assay (200) |
249900 |
900 |
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QuantiNova SYBR Green PCR Kit (500) |
208054 |
2880 | | | |
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規格解釋 ： |
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產品貨號 |
產品名稱 |
規格 |
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77023 |
exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20) |
10 次Maxi大抽+ 10 次Midi中抽（樣本囊泡RNA量不確定時，建議選擇嘗試確定初始樣本） |
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77044 |
exoRNeasy Serum/Plasma Midi Kit(50) |
50次；一次最大抽提1ml血漿/血清 |
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77064 |
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit (50) |
50次；一次最大抽提4ml血漿/血清 | | | |
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https://www.qiagen.com/cn/products/catalog/sample-technologies/rna-sample-technologies/exorneasy-serum-plasma-kits/#orderinginformation
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閱讀原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050002.html
