流式細胞儀光源的那點事
瀏覽次數:5345 發布日期:2015-1-22
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激光是一種相干光源,它能提供單波長、高強度及穩定性高的光照,是細胞微弱熒光快速分析的理想光源。細胞處在快速運動的狀態,每個細胞經過光照區的時間僅為微秒左右,每個細胞所攜帶熒光物質被激發產生熒光信號的強弱與被照射的時間和激發光的強度有關,只有細胞接受到足夠的光照,才能產生相應可被檢出的信號。通常小型流式細胞儀的激光功率在20mW,而貝克曼的CytoFLEX采用的固體激光器最小功率為50mW,最大可達80mW。
應用在流式細胞儀上的激光器可分為兩類:1.氣體激光器:利用氣體或蒸氣作為工作物質產生激光的器件。與固體、液體比較,氣體的光學均勻性好,因此,氣體激光器的輸出光束具有較好的方向性、單色性和較高的頻率穩定性。但氣體的密度小,不易得到高的激發粒子濃度,因此,氣體激光器輸出的能量密度一般比固體激光器小。2.固體激光器:用固體激光材料作為工作物質的激光器,固體激光器可作大能量和高功率相干光源,目前大多數高端流式細胞儀采用此種激光器。
針對不同的熒光染料需要匹配不同顏色的激光,常用的有405nm的紫激光,488nm的藍激光,638nm的紅激光。其中488nm藍激光為最常用的激光,貝克曼CytoFLEX是唯一最多可配置3個激光器的小型流式。不要被多色分析所迷惑,只有配備了個數更多、功率更大的激光器的儀器才真正具備強大的性能。