基因的表達包括相應的mＲNA合成( 轉(zhuǎn)錄) 和蛋白質(zhì)合成( 翻譯) ， 在微生物體內(nèi)進行外來基因的蛋白質(zhì)生物合成依賴于微生物遺傳物質(zhì)和編碼目標蛋白的重組DNA片段。具體步驟如下: 第1步，從供體中分離出編碼蛋白的DNA片段; 第2步，將DNA分子插入到表達載體上; 第3步，將載體轉(zhuǎn)染到宿主體內(nèi); 第4步，培養(yǎng)宿主組織，進行基因的擴增，mＲNA合成和多肽合成; 第5步，純化重組多肽。通常根據(jù)宿主細胞的不同將多肽藥物重組技術(shù)分為兩類: ( 1) 多肽藥物的真核表達; ( 2) 多肽藥物的原核表達。
 
1 多肽合成藥物的真核表達

真核表達的多肽具有定向性強、產(chǎn)品安全衛(wèi)生、原料來源廣泛和成本低等優(yōu)點，可以得到質(zhì)量高、療效好的且活性與天然多肽相當多肽類藥物。目前，真核宿主細胞主要有酵母菌、動物和昆蟲細胞等，而酵母菌在真核表達中最常用。Cao等利用畢赤酵母細胞成功地表達了雞 b－防御素6( AvBD－6)和脫半胱氨酸的AvBD－6－B生物活性肽，并在試驗中發(fā)現(xiàn)二者均具有較強的抑菌作用。Guo等同樣成功地在畢赤酵母細胞中表達了抗菌肽D，該多肽具有較強的抑菌作用，抗菌肽D的酵母表達對抗菌藥物的發(fā)展具有重要的指導意義。蘇彩霞等將乙型肝炎表面抗原( HBsAg) 基因前連接釀酒酵母信號肽，并將整個序列優(yōu)化為漢遜酵母優(yōu)選密碼子，通過PCＲ技術(shù)進行合成，最終在漢遜酵母中成功地表達了重組HBsAg。

2 多肽合成藥物的原核表達

原核表達系統(tǒng)中所應用的宿主細胞包括大腸桿菌、沙門氏菌、枯草芽孢桿菌等，其中大腸桿菌為最常用的原核宿主細胞。利用原核表達重組技術(shù)，可以大量高效地合成多種生物活性多肽，即可通過設計合適的DNA模板來控制多肽的序列，為多肽合成藥物的基因合成奠定了基礎(chǔ)。 Li 等在原核細胞BL21( DE3) pLysS中成功地表達了ChickenIFN－y ，并通過體外實驗證明了ChickenIFN－y 具有較強的抗病毒活性，是原核宿主細胞應用于多肽合成的范例。Lu等利用重組技術(shù)將水蛭素基因與小泛素相關(guān)修飾物( SUMO) 融合，最后在大腸桿菌中高效地表達了水蛭素( HV1) 亞型。傳統(tǒng)的花生油提取工藝主要采用高溫壓榨法和有機溶劑浸提法，這兩種方法由于其中的花生蛋白在高溫下嚴重變性或者是有機溶劑的殘留問題，不能夠充分地被利用，張友維等利用重組技術(shù)成功地在枯草芽孢桿菌中發(fā)酵制備了花生多肽，提高了花生蛋白的利用率。

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