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黃曲霉毒素偶聯(lián)抗原(完全抗原、酶標抗原)合成方法技術

瀏覽次數(shù):2662 發(fā)布日期:2014-4-9  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

    黃曲霉毒素在自然界分布的黃曲霉中,約有 20%的菌株能產(chǎn)生黃曲霉毒素。其中花生、玉米、黃豆及棉籽等作物與其副產(chǎn)品易感染黃曲霉毒素,含黃曲霉毒素量較多,食入后在動物體內主要存在于如肝臟、尿與糞便中。黃曲霉毒素是一種肝臟毒素,能引起肝細胞變質、壞死、出血;目前,黃曲霉毒素的酶聯(lián)免疫法,免疫膠體金法等檢測方法均需要黃曲霉毒素抗原抗體。
(1)黃曲霉毒素半抗原合成(合成技術路線見下圖)
 20-100mg黃曲霉毒素溶于丙酮中,10%硫酸中,于60℃攪拌反應,3h后,蒸干丙酮,用氯仿洗滌4次,蒸干后得到黃曲霉毒素半抗原。

(2)黃曲霉毒素全抗原(人工抗原、完全抗原、酶標抗原)合成
將黃曲霉毒素半抗原與牛血清白蛋白偶聯(lián)得到免疫抗原。
取60mg牛血清白蛋白溶于9.5ml PBS(0.01mol/L,pH5.0)溶液中,加入50微升硼氫化鈉, 室溫攪拌1h,用0.01mol/LPBS透析3天,每天換3次透析液,得到黃曲霉毒素與牛血清白蛋白的免疫抗原。

發(fā)布者:山東藍都生物科技有限公司
聯(lián)系電話:18266598399
E-mail:lvdukeji@126.com

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