取夾竹桃葉碎塊粉末3g，于100ml錐形瓶中加70%乙醇40ml，水浴上浸煮5分鐘，放冷，過濾，濾液（或經處理后--方法參照注二）供鑒別用。
 

[注1]：強心苷的試驗都是在較強的堿性條件下進行，如果樣品中含有蒽醌，也具有紅色反應，防礙檢查，因此在檢查前需先檢查有無蒽醌類成分，若有則應先將其除去，即將乙醇浸液在水浴上蒸發，殘渣加CHCl3熱溶后過濾，CHCl3液用1%NaOH液振搖，去除蒽醌后，CHCl3液供鑒別用。

[注2]：夾竹桃葉或毛地黃葉綠素，常使醇提液帶較深的綠色，影響反應的進行。故需將葉綠素除去，具體方法如下：

 

乙醇浸提液在水浴上揮去大部分乙醇（不讓乙醇揮盡），再加水適量，使含醇量約20%左右，稍熱后即放冷，過濾，濾液即可供試驗用，或將濾液在水浴上濃縮至糖漿狀，加入95%乙醇10ml溶解再供試驗用。

 

（1）三氯化鐵冰醋酸反應（Keller-Kiliani反應）：取醇提液或經處理后的CHCl3或醇液1ml，水浴上蒸干，殘渣溶于冰醋酸2ml中，加入1%FeCl3乙醇液1滴，混合均勻，傾入干燥小試管中，再沿管壁緩慢加入等體積濃硫酸，靜置，二液交界處顯棕色（苷元），漸變為淺綠，蘭色，最后上面醋酸層全呈蘭色或蘭綠色（ -去氧糖）。

（2）堿性3.5-二硝基苯甲酸反應（Kedde反應）：取1ml醇浸提液，加入堿性3.5-二硝苯甲酸試劑3~4滴，產和紅色或紅紫色反應。

（3）亞硝酰鐵氰化鈉反應（Legal反應）：取1ml醇浸提液或經處理后的CHCl3或醇液在水浴上蒸干，用1ml吡淀溶解殘渣，加入0.3%亞硝酰鐵氰化鈉溶液4~5滴，混勻，再加入NaOH飽和乙醇液1-2滴，是否呈現紅色（若結果不明顯可另一取一份供試液如上操作，最后加NaOH飽和乙醇液0-5ml，觀察二液交界面有無紅色）。

（4）堿性苦味酸（Baljet反應）

取樣品醇液1ml，加入堿性苦味酸試劑（苦味酸飽和水液與5%NaOH水液等量混合）數滴，呈現橙或橙紅色。