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禽流感H5,H9,雞新城疫病毒ELISA檢測試劑盒使用說明書

瀏覽次數(shù):2986 發(fā)布日期:2013-8-13  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

【產(chǎn)品簡介】禽流感H5,H9,雞新城疫病毒ELISA檢測試劑盒用于免疫新城疫疫苗后的抗體動態(tài)水平監(jiān)測,指導(dǎo)免疫預(yù)防工作,評估雞場禽流感H5,H9,雞新城疫病毒疫苗免疫狀況,也可用于該病的流行病學(xué)調(diào)查。

【產(chǎn)品內(nèi)容】

試劑盒主要成分

數(shù)量

包被板

96T×1

陽性對照 

1ml×1

陰性對照 

1ml×1

酶標(biāo)結(jié)合物

10ml×1

樣品稀釋液

20ml×1

底物液 

10ml×1

終止液

10ml×1

20×濃縮洗滌液

15ml×1

封口膠

1

使用說明書

1

【成分性狀】

包被板

96孔塑制微孔板,無色透明,干燥,無雜質(zhì)吸附

酶標(biāo)結(jié)合物

略帶黃色澄明液體

陰、陽性對照

略帶黃色澄明液體

樣品稀釋液

無色或略帶黃色澄明液體

濃縮洗滌液

無色或略帶黃色澄明液體

底物液

無色或微藍(lán)色澄明液體

終止液

無色澄明液體,低溫條件下可能會出現(xiàn)絮狀沉淀

【用法與判定】 

1、需要自備的器材

1.1微量移液器;

1.2 微量移液器配套使用的槍頭;

1.3 用來稀釋洗滌液的500ml量筒;

1.4 適用于檢測96T微孔板的酶標(biāo)儀;

1.5 用于稀釋樣品的1.5ml Ep管;

1.6 蒸餾水或去離子水。

2、樣品的制備 

用樣品稀釋液將待檢血清樣品進(jìn)行100倍稀釋(建議:2μl血清樣品加入198μl樣品稀釋液中),樣品加入包被板前要充分混勻,稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。注意:制備血清用的血液樣本應(yīng)無溶血現(xiàn)象發(fā)生;不能稀釋陰性、陽性對照。

3、操作步驟(﹡使用前應(yīng)輕輕旋轉(zhuǎn)或震蕩予以混勻,所有試劑應(yīng)恢復(fù)至室溫

3.1  A1A2孔中分別加入100μl陰性對照;

3.2  A3A4孔中分別加入100μl陽性對照;

3.3  100μl經(jīng)1100稀釋好的待檢樣品加入相應(yīng)孔中,并做好記錄;

3.4  37孵育1h;

3.5  將各孔的液體棄入廢液桶,每孔加250μl的洗滌液(試劑盒內(nèi)20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結(jié)晶,需先溶解后,方可進(jìn)行稀釋)進(jìn)行洗板,重復(fù)5次,每次30s;

加液時防止各孔間洗滌液串流影響檢測結(jié)果,盡量將孔內(nèi)洗滌液拋甩干凈;

3.6  每孔加100μl酶標(biāo)結(jié)合物;

3.7  37孵育1h;重復(fù)步驟3.5;

3.8  每孔加100μl底物液;

3.9  37孵育10min(避光顯色);

3.10 每孔加100μl的終止液;

3.11 立刻于450nm波長處測定各孔的吸光度值,即OD450值。

4、試驗(yàn)有效性判斷

4.1陰性對照:正常情況下,陰性對照孔OD4500.2;

4.2陽性對照:正常情況下,陽性對照孔OD4500.4;

4.3臨界值(C.O.)計(jì)算:臨界值=0.20+陰性對照均值;陰性對照OD450值大于0.2時應(yīng)舍棄,如所有陰性對照OD450值均大于0.2時須重復(fù)實(shí)驗(yàn);陰性對照低于0.05時以0.05計(jì)算。

4.4結(jié)果判定: 檢測樣品OD450臨界值,判定該檢測樣品為陽性; 檢測樣品OD450值<臨界值,判定該檢測樣品為陰性。

【注意事項(xiàng)】

1)待檢血清樣品數(shù)量過多時,應(yīng)先使用血清稀釋板將所有待檢血清稀釋完畢后,再統(tǒng)一將血清樣品加入酶標(biāo)板中,使反應(yīng)時間一致。

2)試劑盒使用的過程中不要吸煙、喝水和吃東西。

3)底物液和終止液對皮膚有刺激性,注意防護(hù)。

4)底物液不要暴露于強(qiáng)光和任何氧化劑;使用潔凈的玻璃和朔料容器處理底物液。

5)所有試劑應(yīng)在28存放;使用前恢復(fù)到室溫,使用后放回28

6)注意防止試劑盒組分受到污染。

7)不要使用超過有效期的試劑,不同批次試劑盒的組分不要混用。

8)操作過程中的移液、時間和洗滌必須精確。

【規(guī)格與包裝】96T×1

【貯藏與有效期】28避光保存,有效期為6個月

發(fā)布者:山東藍(lán)都生物科技有限公司
聯(lián)系電話:18266598399
E-mail:lvdukeji@126.com

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