光度分析法是最常用的定量分析方法之一, 在光度分析法中,比色皿的選擇、使用和維護(hù)對(duì)分析結(jié)果有著重要的影響。萊貝就來(lái)談?wù)劰舛确ㄖ斜壬蟮倪x擇。
分析波長(zhǎng)在350 nm以上時(shí),我們可以選用玻璃或石英比色皿,而在350 rll/i以下時(shí)必須使用石英比色皿 。
比色皿有不同的光程長(zhǎng)度,一般常用的有0.5、l、2、3、5∞ ,選擇哪種光程長(zhǎng)度的比色皿,應(yīng)視分析樣品的吸光度而定。當(dāng)比色液的顏色較淡時(shí),應(yīng)選用光程長(zhǎng)度較大的如2 cm、3∞ 比色皿;當(dāng)比色液的顏色較深時(shí),應(yīng)選用光程長(zhǎng)度較小的如0.5 m 、lⅢ比色皿,以使所測(cè)溶液的吸光度在0.1 0.7之間。
比色皿有方向性。有些比色皿上標(biāo)有方向標(biāo)記,使用時(shí)必須注意。無(wú)方向標(biāo)記的比色皿應(yīng)予以校正,校正時(shí)要先確定方向并作好標(biāo)記.以減少測(cè)定誤差。比色皿的校正方法是:將純凈的蒸餾水注入比色皿中,把其中吸收最小的比色皿的吸光度置為零,并以此為基準(zhǔn),測(cè)出其它比色皿的相對(duì)吸光度。測(cè)定比色液時(shí),應(yīng)將其吸光度減去比色皿的吸光度。同一組比色皿相互間的差異應(yīng)小于測(cè)定誤差 在測(cè)定同一溶液時(shí),吸光度差值應(yīng)小于0.5% ,否則應(yīng)對(duì)差值進(jìn)行校正。
比色皿的光程長(zhǎng)度也需校正,校正時(shí)可將吸光度約為0.4的溶液分別注入校正皿和具有準(zhǔn)確光程長(zhǎng)度的標(biāo)準(zhǔn)比色皿中,測(cè)定吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)比色皿的吸光度為1.o0,求出校正比色皿吸光度的相對(duì)值作為該比色皿的校正系數(shù)。測(cè)定比色液時(shí),可將所測(cè)得的吸光度乘以該皿的校正系數(shù)以得到實(shí)際吸光度值。