2023年3月2日,北京同立海源生物科技有限公司線上直播《小核酸藥物開發從體外轉染到體內遞送全解析》已圓滿結束。在此小編代表同立海源所有員工感謝大家的熱情參與,以及對公司及本次直播的大力支持!
本次線上直播特邀了小核酸藥物領域資深專家圣諾集團大中華地區CSO 楊憲斌博士、浙江海昶生物首席科學家 李劍光博士與同立海源高級產品應用經理 劉叢女士分別就《THE GOLDEN TIME OF RNAi THERAPEUTICS》、《新型脂質納米粒mRNA給藥系統》及《小核酸藥物開發從體外轉染到體內遞送全解析》三個主題展開了精彩分享,同時與直播間觀眾進行了學術互動。
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1. 直播精彩回看
不用擔心,我們已準備好線上直播回放,并將課程內容的精彩答疑整理打包給您!
2. 與專家近距離交流
沒問題!我們建立了技術交流群。本群為邀請制,未入群的小伙伴可以掃碼入群交流探討。
技術交流群~同立海源
3. 精彩答疑公布
安排上,小編整理了直播過程中大家的提問及各位專家的精彩解答(解答部分)。
A: siRNA需要修飾是歷史發展的過程,剛開始開發小核酸藥不需要修飾,用納米材料或者其他材料包裹,在2018年第一款小核酸藥物開發出來發現有很多副作用,并且效果也不理想。后來開發小核酸藥開始嘗試暴露在外面進行靶向遞送到肝細胞,不過在遞送過程中發現各種酶發生降解,開發人員開始嘗試各種修飾。siRNA進行修飾后不但可以增加藥物穩定性,而且還可以增加其強效性。
siRNA是不是會完全取代反義核酸?
A:從基因沉默的角度看,siRNA似乎可以取代反義核酸,因為siRNA的效率更高。不過還不能說完全取代,首先siRNA是雙鏈的,成本也相應高一些,需要給藥系統,對于肝臟可能問題不大,對肝外還是會有一些問題存在。就這個角度,反義核酸給藥系統要求沒有那么高,相對比較穩定,對于腔內注射反義核酸的效果是比較好的。從剪切和調控機制siRNA明顯是可以取代反應核酸的,另外基因沉默靶點這塊可以考慮用siRNA取代反義核酸可以達到更好的效果。
相比于mRNA,siRNA是不是更有轉化前景?
A:mRNA的特點是表達后的蛋白可以用于基因編輯、CAR-T或者疫苗。siRNA主要用來封閉基因,它們都有不同的重點用途。不過mRNA需要納米遞導,不包封沒有足夠的穩定性,并且有復雜的專利覆蓋和成本及技術上的挑戰。siRNA因為是全合成,很容易生產,操作性更強,也沒有專利覆蓋,所以兩者發展前景目前很難說。
和市面上的轉染試劑相比,貴公司轉染試劑(TL-1001)有什么特別之處?
A:產品優勢主要在于通過提升內含體的逃逸水平。傳統轉染試劑可通過表面正電荷幫助siRNA大量攝取入胞,但入胞后siRNA內含體逃逸水平低,造成攝取的siRNA無法發揮作用,同時造成細胞毒性。本品為非強正電型脂質轉染試劑,避免細胞大量攝取造成的毒性,但本品可提升細胞內吞后的siRNA內含體逃逸效率,通過促進內含體逃逸使更多siRNA釋放入細胞質中實現高效基因沉默作用。故在細胞水平上通過熒光標記siRNA進行條件優化的方法不適用于本轉染試劑。推薦使用Western Blot或QPCR方式對最佳轉染濃度進行優化。
LipidnanoTM Super RNAi轉染試劑(TL-1001)如何使用呢?
A:產品組分有A液和B液,將siRNA配液放入EP管,加入A液混合均勻,再加入B液混合均勻,室溫下放置5分鐘,再加入相應的培養基到孔板即可。詳見產品說明書。
用LipidnanoTM Super RNAi轉染試劑,推薦siRNA用量大概是多少?
A: 建議用量
注:使用本轉染試劑對細胞進行siRNA轉染時,為了獲得最佳基因沉默效果,每一種細胞系轉染siRNA的劑量都需要經過實驗確定最佳范圍。
目前影響LNP靶向的因素是什么?
A:目前LNP靶向影響的因素有表面電荷,相關文獻指出調節LNP表面電荷成強正電可以直接進入肺臟,可以被細胞直接吸收;如果變成負電就會進入脾臟,因為脾臟對于帶有負電的LNP有纖維的涉及;如果是中性電就會進入肝臟。另外影響因素就是進行表面修飾,也可以用抗體導入T細胞進行體內給藥,相關體內靶向也有相關的成功案例。