重磅！日本 On-Chip 公司推出液滴生成儀

瀏覽次數(shù)：11079　發(fā)布日期：2016-8-1　來(lái)源：本站　本站原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處

近年，油包水（W/O）乳化液滴被特殊的應(yīng)用于遺傳分析的最小反應(yīng)體積，例如數(shù)字PCR（dPCR）及下一代測(cè)序（ NGS ），藥物研發(fā)的基礎(chǔ)及應(yīng)用，逐漸增加的以細(xì)胞為基礎(chǔ)的高通量篩選需求及高內(nèi)涵篩選可以同時(shí)進(jìn)行生物活性及毒理分析，W/O被用于以細(xì)胞為基礎(chǔ)的高通量篩選，例如生物活性及毒理評(píng)估，所謂的體外區(qū)分（IVC）方法可以更有效及經(jīng)濟(jì)的評(píng)估通過(guò)微尺度上精簡(jiǎn)實(shí)驗(yàn)，從而使酶反應(yīng)或胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在單個(gè)液滴中進(jìn)行。

日本On-Chip公司最新推出的液滴生成儀可用在包裹細(xì)胞、細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)菌，包裹of Cdna,肽、物質(zhì)庫(kù)，乳化液滴數(shù)字PCR等多個(gè)領(lǐng)域，它不僅可以通過(guò)乳化液滴分離單細(xì)胞，還可通過(guò)乳化液滴進(jìn)行數(shù)字PCR。

On-Chip液滴生成儀

液滴生成儀原理：
☆ 生成相同及穩(wěn)定的液滴
能夠產(chǎn)生穩(wěn)定及相同大小的液滴使用我們一次性微流控芯片
☆ 通過(guò)壓力調(diào)節(jié)的液滴大小調(diào)節(jié)
通過(guò)樣本或油的壓力控制調(diào)節(jié)液滴尺寸大小
☆ 通過(guò)顯微鏡單元監(jiān)測(cè)液滴生成
實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)液滴生成

On-chip液滴生成儀技術(shù)參數(shù)：

實(shí)例說(shuō)明
1,、液滴生成器生成數(shù)字PCR 乳化液滴
系統(tǒng)和試劑
　　・On-chip 液滴生成器
　　・油滴生成器(基于礦物油) 　　　　　　               ・PCR 試劑
    -礦物油（Light Oil, Sigma, M8410)                  -DNA 模版
   -Sun Soft No. 818SK (Taiyo Kagaku)                 -引物
    -Span 80 (Sigma, S6760)                            -SsoFast™ EvaGreen® Supermix (Biorad)
過(guò)程
　　・分離生成的包括PCR試劑在內(nèi)的油滴和樣本到芯片上，并在 On-chip 生成器上設(shè)置　
    ・運(yùn)行軟件并開始運(yùn)行液滴生成
　　・通過(guò)壓力設(shè)定控制液滴大小　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
系統(tǒng)
　　・PCR 熱循環(huán)儀

2、分離和鑒定微生物的油包水乳化液
通過(guò)創(chuàng)建一個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞可以生長(zhǎng)的水/油乳化液滴環(huán)境,可以分離和鑒定目標(biāo)微生物系統(tǒng)和試劑
　・E. coli 表達(dá) GFP在PBS+Km 溶液中，(約一個(gè)液滴一個(gè)細(xì)胞)
　・E. Coli 濃度設(shè)定1x106 pcs/ml
　・礦物油, Span80 4.5%, Tween 0.4%, TritonX-100 0.05%
　・液滴生成; 樣本: 7.3kPa,
　・剪切力: 9.5kPa -> about 40 uM

液滴可在芯片庫(kù)中存儲(chǔ)達(dá)20小時(shí)