近期，賓夕法尼亞大學的James Riley課題組和Sangamo公司共同公布了一項用于HIV治愈的I期臨床試驗成果，結果喜人。該研究試驗利用Maxcyte GT臨床級流式電轉系統對HIV患者CD4 T細胞CCR5基因編輯并回輸，以確定這些T細胞如何更好地實現HIV治愈策略。該結果近期已發表在The Journal of Clinical Investigation雜志上。論文標題為：CCR5-edited CD4 Tcells augment HIV-specific immunity to enable post rebound control of HIV replication.

 

研究目的：本次臨床試驗探討了鋅指核酸酶（ZFN）體外遞送的方法，CCR5Δ32雜合子是否優先受益，CCR5基因編輯的CD4 T細胞對HIV特異性T細胞應答的影響以及注入的CCR5基因編輯T細胞在分析治療中斷期間延遲病毒反彈的能力。

研究方法：本試驗采用電轉與鋅指核酸酶（ZFN）結合的體外傳遞方法，首先獲取自體外周血淋巴細胞，分離并富集CD4+細胞。利用MaxCyte-GT^TM流式轉染系統，在封閉系統中用ZFN-mRNAs對CD4+T細胞進行電穿染，對轉染后的CD4+T細胞進行擴增。研究招募了14名HIV感染者，他們的病毒載量通過抗逆轉錄病毒療法（ART）得到了很好的控制。研究測量了停藥后病毒反彈的時間，CCR5編輯的CD4 T細胞的持久性以及回輸100億個CCR5基因編輯的CD4 T細胞是否增強了HIV特異性免疫反應。在完成細胞回輸后，參與患者進行試驗性停藥。

 

研究時間線和樣本采集點的示圖

研究結果：這項研究發現回輸CD4 T細胞耐受性良好，沒有嚴重的不良事件。HIV功能性治愈的金標準是試驗性停藥后病毒反彈時間推遲。與歷史對照相比，觀察到病毒反彈時間略有延遲；14個人中有3個人，似乎在最終反彈之前恢復了對病毒血癥的控制（其中2個為CCR5Δ32雜合子）。

值得一提的是，只有這些個體的HIV特異性CD8 T細胞反應顯著恢復。在后期病毒反彈時，觀察到病毒對其中一種重新激活反應的免疫逃逸，這說明病毒控制和增強的CD8 T細胞應答之間存在直接聯系。

這項臨床研究表明，CCR5基因編輯的CD4 T細胞回輸可以通過增強已存在的HIV特異性免疫應答，來幫助實現HIV功能性治愈。

治療中斷期間病毒反彈時間

Sangamo利用MaxCyte電轉平臺開展多項HIV治療研究項目
Sangamo是一家全球領先的基因治療公司，已經與Maxcyte開展了廣泛的合作，利用Maxcyte流式電轉平臺進行多個臨床項目的研發，尤其是在HIV治療領域。2016年Sangamo公司聯合美國多所實驗室利用在基因編輯中利用Maxcyte電轉技術實現對CCR5基因在人體造血干細胞中的敲除，結果表明有效的雙等位基因CCR5敲除效率達到72.9%，經過清洗、標記、CD34篩選以及電轉后的總回收率達70%，并在臨床前體內和體外實驗中都表現出了CCR5基因敲除的可行性和安全性（詳見參考文獻2）。
 
Maxcyte利性的非病毒細胞工程平臺-流式電轉技術平臺，為全球生物醫藥行業的合作伙伴賦能，幫助客戶開發創新性的細胞療法，來滿足病人對先進細胞療法的需求。利用Maxcyte ExPERT電轉平臺結合基因編輯手段安全高效可高度重復地對人體原代細胞進行遺傳改造，在符合臨床使用的嚴格標準前提下，用于治療遺傳性疾病和癌癥。Maxcyte具有全球技術支持網絡，目標是幫助合作伙伴釋放它們產品的所有潛能。

Maxcyte已被全球范圍內用戶認可，全球前十制藥公司都采用Maxcyte技術平臺進行藥物研發，歐美主要基因編輯和細胞治療公司與Maxcyte合作進行新型的基因和細胞治療產品開發，如Allogene therapeutics，Editas medicine，CRISPR Therapeutics，Precision biosciences和Kite pharma等。多個頂級學術研究機構采用Maxcyte技術研究哺乳動物細胞和干細胞， 如日本京都大學iPS細胞研究所（CIRA）和美國賓夕法尼亞大學。

[1] Pablo Tebas, Carl H. June, James L. Riley, et al. CCR5-edited CD4 T cells augment HIV-specific immunity to enable post rebound control of HIV replication[J]. J Clin Invest. 2021.
[2] Digiusto D L, Cannon P M, Holmes M C, et al. Preclinical development and qualification of ZFN-mediated CCR5 disruption in human hematopoietic stem/progenitor cells[J]. Molecular Therapy Methods & Clinical Development, 2016, 3(C):16067.