2020年至今，COVID-19席卷全球，目前已造成世界數(shù)千萬人感染，數(shù)百萬人失去生命。新冠病毒致病機(jī)制是通過病毒表面的刺突蛋白(S蛋白)與肺部上皮細(xì)胞表面ACE2蛋白質(zhì)結(jié)合，隨后，病毒會(huì)趁機(jī)侵入人體細(xì)胞。人體內(nèi)也會(huì)啟動(dòng)相應(yīng)的免疫程序，產(chǎn)生針對新冠病毒S蛋白的抗體稱之中和性抗體。它們可以結(jié)合病毒表面S蛋白，阻斷S蛋白與ACE2的結(jié)合，從而阻斷病毒進(jìn)入細(xì)胞。故能夠在血清中檢測中和性抗體的親和力顯得尤為重要以及康復(fù)者或者疫苗注射者血清（漿）內(nèi)中性抗體的結(jié)合力顯得尤為重要。

1. 首先它是發(fā)揮抗病毒效應(yīng)的主要力量；

2. 目前我國對重癥病人和危重癥病人采取康復(fù)者血漿治療；

3. 傳統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)的VNTs，亦或是基于Elisa的sVNTs，都不能提供關(guān)于是通過低濃度弱結(jié)合親和力的NAbs還是低濃度緊密結(jié)合親和力的NAbs來實(shí)現(xiàn)病毒中和的信息；

4. 市面上主流的分子互作系統(tǒng)都是基于表面結(jié)合的原理，而我們知道，在體內(nèi)的結(jié)合并非發(fā)生在結(jié)合表面上，故這些方法不能完全反映出真實(shí)的結(jié)合狀態(tài)；

英國劍橋大學(xué)科學(xué)家團(tuán)隊(duì)經(jīng)過不懈努力，在Fluidity One-W微流控?cái)U(kuò)散檢測儀后,又推出了一款專門針對病毒檢測的儀器(Fluidity One-W Serum),它可以在血清中（50ul）直接檢測病毒抗體濃度及結(jié)合強(qiáng)弱，該方法不需要固定，能夠在接近生命體的環(huán)境中檢測，得到的數(shù)據(jù)也就更貼近真實(shí)值。
 

優(yōu)勢

1. 在溶液中檢測，無需表面固定，無非特異性結(jié)合

2. 在更接近天然的狀態(tài)下分析相互作用

3. 直接在最小稀釋血清中進(jìn)行抗體親和力分析和濃度測定，以進(jìn)行全面的免疫反應(yīng)評估

4. 簡單易操作

5. 可以迅速測定蛋白是否降解

6. 可以進(jìn)行化學(xué)計(jì)量學(xué)測定，可以測定分子間結(jié)合比例

7. 一次性芯片減少交叉污染

應(yīng)用案例
案例1

在新冠疫情爆發(fā)前對照血清中測量了重組ACE2和S1結(jié)合的KD值。隨著S1濃度的增加，有效流體動(dòng)力學(xué)半徑（Rh）也增加了，說明了蛋白質(zhì)復(fù)合物ACE2–S1的有效結(jié)合（圖B）。同樣，在對照血清測量了單克隆Nab和S1結(jié)合的KD值（圖D）。將NAb添加到濃度為10 nM的熒光標(biāo)記的ACE2和濃度為50 nM的S1的混合物中會(huì)導(dǎo)致Rh減少，因?yàn)镹Ab1與S1結(jié)合，從而從復(fù)合物中置換出ACE2。通過ACE2-S1和Nab-S1親和力，并基于競爭結(jié)合模型預(yù)測抑制等溫線(圖D紅色)，這與實(shí)驗(yàn)得到的抑制等溫線非常一致（圖D黑色）。之后還將該方法應(yīng)用于兩個(gè)新冠呈陽性的病人的血清中。

該款儀器的誕生實(shí)現(xiàn)了溶液中受體結(jié)合競爭分析，可以測定多克隆血清抗體的有效解離常數(shù)(KD)及其濃度；為選擇恢復(fù)期血漿治療供體提供鑒定；為治療性抗體開發(fā)和疫苗開發(fā)的候選先導(dǎo)物提供鑒定。
案例2

使用微流體抗體親和譜分析（MAAP），確定了42名血清陽性患者血漿樣本中抗SARS-CoV-2抗體的總親和力和濃度，其中23名經(jīng)PCR測試確認(rèn)為SARS-CoV2陽性。研究發(fā)現(xiàn)，盡管具有相似的抗體濃度，抗RBD抗體的解離常數(shù)（Kd）卻超過了兩個(gè)數(shù)量級，從80 pM到25 nM。該款血清抗體檢測儀（Fluidity One-W Serum）測定結(jié)果與基于細(xì)胞的中和測定法非常吻合。(如上圖)。最后確定了針對SARS-CoV-2的免疫反應(yīng)具有識別其他冠狀病毒的RBD表位的能力，這表明活化的記憶B細(xì)胞可能會(huì)產(chǎn)生中和的抗體，即使由其他未來的SARSCoV-2變體觸發(fā)也是如此。抗體濃度和親和力之間的關(guān)系可能會(huì)影響血漿置換，并靶向適當(dāng)?shù)谋砦灰赃M(jìn)行有效中和。

從全文結(jié)果來看只有具有非常高的Kd值的患者才應(yīng)被視為血漿置換的獻(xiàn)血者，這是常規(guī)方法無法充分獲取的。故血漿總免疫球蛋白對SARS-CoV-2的親和力可作為評價(jià)SARS-CoV-2免疫應(yīng)答質(zhì)量的指標(biāo)，該款血清抗體檢測儀（Fluidity One-W Serum）有助于選擇最有效的樣本進(jìn)行治療性血漿置換。

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