外泌體微囊泡因其攜帶蛋白,脂分子和核酸等物質,在細胞之間信號傳導方面扮演重要角色,在重大疾病基礎研究,臨床診斷與治療等方面均引起了極大關注。
流式分析技術,因其可對單顆粒樣品進行快速,多參數和精準定量分析,快速成為外泌體微囊泡分析的有力工具。
然而,外泌體微囊泡因其尺寸偏小(一般分布在30-300nm,主要集中在100-200nm),大小不一,樣品濃度高,折射率低,形態和組成高度異質性,給流式分析技術帶來極大挑戰:
傳統流式分析技術,其散射光靈敏度專注分析細胞,一般無法利用散射光直接分析小于300nm的外泌體微囊泡小顆粒;
有些流式方案嘗試用熒光標記方案分析外泌體微囊泡,卻常會面臨集群分析問題,難以絕對精準定量和單顆粒熒光標記分析(因其液流系統原本專為大顆粒分析優化設計,樣本流速多在10ul/min以上);
即使有些流式分析方案,在散射光靈敏度方面先后取得了技術突破,仍又時常面臨分析外泌體微囊泡這一特殊樣品對儀器靈敏度,穩定性以及檢測速度方面要求極高的問題。
那么如何全面評估所選流式方案,是否可以更靈敏,更精準,更穩定,更快速的分析大量外泌體微囊泡樣品呢?
近日來自加拿大阿爾伯塔大學和專注體外診斷先進技術研發的Nanostics公司等用戶單位,結合自身優勢經驗,給出外泌體微囊泡納米流式分析性能驗證的最佳標準。該驗證標準分析角度極其嚴謹全面,具體驗證內容包括以下十個方面:
1.靈敏度&分辨率
2.重復性&穩定性
3.精準性&準確性
4.樣品殘留率
5.流速穩定性
6.濃度分析線性度
7.熒光分析靈敏度&線性度
8.單顆粒分析&集群分析
9.獲得統計意義數據所需時間
10.相同樣品重復連續上樣穩定性
以上測試工作,研究人員采用Apogee納米流式用于分析驗證。其中,Apogee納米流式專為納米顆粒快速,多參數,超靈敏和精準分析優化設計,其極佳穩定性能備受認可關注,在外泌體微囊泡等納米顆粒樣本方面參與發表數百篇應用文章。以上十項性能驗證結果顯示,Apogee納米流式測試結果全部通過了臨床級高標準分析要求。這對外泌體微囊泡臨床樣品研究分析,基礎科研高標準高穩定性分析以及納米流式極佳性能全面分析具有極其重要參考價值。更具體參考信息,請點擊參考文獻。
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