近日,德國BMG公司與Promega公司合作推出了超靈敏發光活細胞實時監測方案。該方案通過BMG多功能酶標儀CLARIOstar Plus-ACU,在活細胞上結合NanoBRET 技術,對利用PROTACs降解靶標蛋白的關鍵步驟可實現精準實時監測。
精準實時監測這些關鍵步驟,如PROTACs介導的三元復合物形成過程和靶標蛋白泛素化及降解過程,對于精細優化PROTACs分子,深入了解靶標蛋白降解效率等至關重要。同時,這些關鍵步驟中的細胞內源性靶標蛋白,均可通過CRISPR/Cas9基因編輯技術融合HiBit蛋白標簽,之后可利用NanoBRET技術在CLARIOstar Plus-ACU進行超靈敏實時監測。
該方案對即使很低濃度的PROTACs,也顯示出超靈敏的檢測效果。此類應用方案可為更好地理解分子優化策略,最終助力設計和研發出高效的PROTACs藥物提供極具應用價值的解決方案。
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