格羅貝爾在深圳先進(jìn)院舉辦神經(jīng)元成像小鼠手術(shù)培訓(xùn)
瀏覽次數(shù):3463 發(fā)布日期:2020-4-22
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應(yīng)中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院腦認(rèn)知與腦疾病研究所(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“深圳先進(jìn)院”)邀請(qǐng),格羅貝爾生物科技公司Global Biotech Inc,為深圳先進(jìn)院圓滿(mǎn)舉辦了一場(chǎng)由
格羅貝爾引進(jìn)中國(guó)并始終為中國(guó)代理的inscopix nVoke2.0在體自由動(dòng)物神經(jīng)元成像應(yīng)用的技術(shù)培訓(xùn)。
當(dāng)日,深圳先進(jìn)院20余名科研人員參加了這次inscopix nVoke2.0的小鼠手術(shù)培訓(xùn)。格羅貝爾生物科技公司技術(shù)人員帶領(lǐng)大家一道順利完成手術(shù)全過(guò)程。
我們對(duì)手術(shù)過(guò)程做以下記錄,供神經(jīng)科研人員參考:
- 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備好所有的手術(shù)器械。
- 小鼠麻醉后,將小鼠的頭部固定在腦定位儀上,打開(kāi)頭頂皮膚,將頭骨上面清理干凈,露出清晰骨縫,找到Bregma,Lambda點(diǎn),將前后水平調(diào)好后,在Lambda和Bregma連線(xiàn)的中間位置,往左右兩邊取相同距離,進(jìn)行左右水平的調(diào)整。
- 根據(jù)算出來(lái)的目標(biāo)組織位點(diǎn),在目標(biāo)位置在頭骨上的投影點(diǎn)處鉆一小孔,將準(zhǔn)備好的病毒液體注射入目標(biāo)位點(diǎn),創(chuàng)口消毒消炎處理,縫合皮膚。
- 2~4周以后,在之前打病毒的位置,用同樣方法定位出目標(biāo)位點(diǎn)。
- 根據(jù)打算植入的透鏡粗細(xì)判斷要鉆孔的大小,骨孔直徑比透鏡直徑粗0.3~0.4mm即可,在目標(biāo)點(diǎn)位四周相應(yīng)位置處標(biāo)出鉆孔邊緣位置,用電鉆鉆骨孔。一般要觀察的目標(biāo)位點(diǎn)要比透鏡底端低約200微米即可,如果要觀察的是較淺皮層位置,可以直接埋植透鏡,如果要觀察的是較深的腦區(qū),則需要將埋植位點(diǎn)以上300~400微米以外的柱形腦組織區(qū)域全部除去。
- 可以用相應(yīng)粗細(xì)的平頭注射針頭連接上真空泵,用適宜壓力吸除組織,吸除過(guò)程中不斷在腦組織上方灌注生理鹽水進(jìn)行抽吸以去除血液,吸到目標(biāo)位置上方約300~400微米即可,孔洞直徑參考要埋植的透鏡粗細(xì),直到血液不再流出可停止灌流。
- 在距離鉆孔約5mm處鉆2~3個(gè)淺孔,擰入2~3枚骨螺絲釘。
- 將透鏡與微型顯微鏡連接到夾持桿,并固定在定位儀上。
- 打開(kāi)數(shù)據(jù)采集軟件,打開(kāi)顯微鏡激發(fā)光,實(shí)時(shí)觀察畫(huà)面,將透鏡慢慢深入動(dòng)物腦內(nèi),關(guān)閉小鼠周?chē)膹?qiáng)光,此時(shí)采集軟件上大部分為黑色,待透鏡接近目標(biāo)病毒表達(dá)位置時(shí),病毒的綠色熒光會(huì)使得畫(huà)面較明顯的變亮,根據(jù)畫(huà)面中模糊能看出血管的影像或采集軟件中光強(qiáng)的histogram峰值在7000左右,可以在此位置埋植透鏡。
- 用牙科水泥將骨螺釘和透鏡上的黑色膠圈粘合在小鼠頭骨上。
- 待牙科水泥完全干燥堅(jiān)硬后,將透鏡夾持器小心取下。用黃藍(lán)遮蓋硅膠混合為完全綠色,涂在透鏡上端。
- 待小鼠恢復(fù),需單籠飼養(yǎng),防止被啃咬透鏡。
多年來(lái),格羅貝爾生物科技公司Global Biotech Inc,與深圳先進(jìn)院保持良好的技術(shù)交流和合作,并每年作為金牌贊助商參加深圳先進(jìn)院舉辦的各類(lèi)腦科學(xué)會(huì)議和培訓(xùn)班,為中國(guó)腦科學(xué)發(fā)展做出力所能及的貢獻(xiàn)。
特別聲明:
近期,有公司和個(gè)體不斷擾亂Inscopix中國(guó)市場(chǎng),希望中國(guó)科研人員向Inscopix一進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)就選擇并始終為中國(guó)代理----格羅貝爾生物科技公司(美國(guó)Global Bietech Inc,)詳細(xì)咨詢(xún)、核實(shí),辨別其他推銷(xiāo)公司的規(guī)模、特別是技術(shù)團(tuán)隊(duì)能力,以免受損。