基礎科研和高通量藥物篩選常用檢測體系優化，pH值是其中一個至關重要的影響因素。常見的生物酶活性，蛋白結構，結合動力學等生化分子反應均受反應體系的p H值影響。 因此，pH的精確測定對于體系優化等日常實驗尤為重要。然而，常用的傳統電極測定法，因其操作過程繁瑣（包括校正，沖洗，測定，沖洗等），大大限制了高通量樣品pH測定過程。

對此，近期德國BMG公司利用其專利的超快速全光譜檢測酶標儀（SPECTROstar Nano）和美國Hudson Robotics Inc公司全自動移液工作站（SOLO自動移液器，Micro 10X分液器以及PlateCrane EX Robotic Arm高通量機械）開發出高通量自動化pH檢測方案（圖1）。


該方案利用pH指示劑溴百里香酚藍在不同酸堿環境下有不同吸收光譜這一特性進行精確定量。溴百里香酚藍有兩種存在形式：基礎形式在620nm附近有最大吸收峰，中性形式在400-430nm有最大吸收峰。以往的方案中，利用基礎形式的溴百里香酚藍測定pH的比較常見。然而這種檢測單一最大吸收波峰的方案，非常容易受溶液各種因素的影響，任何微小體積變化，溶液成份變化，都會影響最大吸收波長測定結果。本次介紹的新方案利用中性形式的溴百里香酚藍，通過測定其在不同pH溶液中的吸收光譜信息（圖2），快速準確測定溶液pH值（圖3）。