酶標儀實際上就是一臺微孔板專用分光光度計：光源發出的光波經過濾色器，進入微孔中的待測標本.該單色光一部分被標本吸收，另一部分則透過標本照射到光電檢測器進行測量。

目前常規酶標儀比較普遍使用的光源為鹵素燈等。LED作為一種新光源以其自身許多優勢慢慢被許多酶標儀所采用。

鹵素燈泡為白熾燈的一種，鹵素燈的玻璃外殼中充有一些鹵族元素氣體。其優點為經濟，簡單。但缺點為鹵素燈最佳能量是在1000nm，但酶免檢測常用的波長是340-600nm,只占高峰值的10-20%能量而已，所以有效效能非常低。因鹵素燈工作過程中產生大量熱量，儀器需要設計良好散熱系統，這也解釋了為什么鹵素燈壽命短及隨著時間/使用次數，效能會大幅下降的特性。 一般簡單的吸收光檢測，使用鹵素燈酶標儀是沒問題的，但要確保性能效果，需要至少一年更換一到兩次燈泡。

氙燈是利用氙氣放電而發光的電光源。燈內放電物質是惰性氣體氙氣。優點為一般無需預熱，隨開隨用，壽命比鹵素燈長，只產生少量熱量，所以效能及壽命比鹵素燈好。缺點是價錢高。但一般靈敏度需求高的研究如熒光相關的研究，及高端多功能酶標儀都推薦用氙燈。

藍光LED為2014年諾貝爾得獎研究，LED(發光二極管）是指利用發光二極管作為光源的技術。在同等效率下，LED燈壽命是傳統鹵素燈的10倍以上，只產生極少量的熱量，免去了頻繁的更換燈泡和等待燈泡預熱所帶來的麻煩，其光源能量強（可達所選的波長90%或以上）、穩定性好，所以有助于提高檢測的靈敏度，線性度，準確性和精確度，其價錢十分大眾化，非常適合一般常規酶標儀使用。