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河南省腫瘤醫(yī)院，生物醫(yī)學(xué)研究室研究員，趙承彥
作為一位科研工作者，接觸到中國生物器材網(wǎng)也有好幾年的時(shí)間了。平時(shí)遇到需要采購一些儀器也會(huì)習(xí)慣在生物器材網(wǎng)搜索查詢。近日恰巧登陸網(wǎng)站看到20周年的征文活動(dòng)，就從我平時(shí)工作接觸到的細(xì)胞計(jì)數(shù)為例，說一些我的看法和建議。 目前生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器都存在一些問題，細(xì)胞計(jì)數(shù)準(zhǔn)確度都不高。細(xì)胞計(jì)數(shù)的目的是確定細(xì)胞懸液里的細(xì)胞密度，要求真實(shí)、準(zhǔn)確。細(xì)胞密度是單位體積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞密度由計(jì)數(shù)樣本體積和樣本體積里細(xì)胞數(shù)兩個(gè)測(cè)量參數(shù)構(gòu)成。兩個(gè)測(cè)量參數(shù)有一個(gè)計(jì)量不準(zhǔn)確，細(xì)胞密度就不準(zhǔn)確。根據(jù)這兩個(gè)測(cè)量參數(shù)，看看目前常用的幾種細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器存在的問題。 包括最常用的血球計(jì)數(shù)板，流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)分析儀，這三種類型的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，涵蓋了現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域細(xì)胞計(jì)數(shù)的基本技術(shù)和方法。三種類型細(xì)胞計(jì)數(shù)方法存在的主要問題是檢測(cè)獲得的細(xì)胞密度都不夠準(zhǔn)確，其次還存在兩個(gè)問題：一是檢驗(yàn)細(xì)胞樣品不能回收再用，二是不能準(zhǔn)確計(jì)數(shù)總量小于1000個(gè)細(xì)胞的樣本。例如，極限稀釋細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)是研究細(xì)胞增殖、分化、凋亡的一種方法，需要準(zhǔn)確計(jì)數(shù)幾百個(gè)細(xì)胞，然后回收單個(gè)種植到培養(yǎng)孔內(nèi)。上述三種細(xì)胞計(jì)數(shù)方法都做不到。 計(jì)數(shù)細(xì)胞獲得一個(gè)準(zhǔn)確的細(xì)胞密度，看起來很復(fù)雜，難度很大，實(shí)際上真正理解了細(xì)胞計(jì)數(shù)的目的和要求也不難解決。如果能夠準(zhǔn)確取一定量細(xì)胞樣本，放到一個(gè)容器里，準(zhǔn)確記錄全部細(xì)胞，問題就解決了。怎樣準(zhǔn)確記錄一個(gè)容器里的全部細(xì)胞？如果容器里有幾百個(gè)細(xì)胞，無規(guī)律分布在底面上，用顯微鏡觀察，全部準(zhǔn)確計(jì)數(shù)出來不太可能，如果把容器底部分割成許多個(gè)方格，標(biāo)出行列號(hào)，一個(gè)方格中只有幾個(gè)細(xì)胞（不超過10個(gè)），很容易準(zhǔn)確記錄出來，既不會(huì)漏計(jì)，也不會(huì)重計(jì)，將各個(gè)方格里的細(xì)胞數(shù)匯總起來就是全部細(xì)胞數(shù)。實(shí)際上將細(xì)胞培養(yǎng)板底部標(biāo)記上方格，用之替代血球計(jì)數(shù)板和Cellometer的細(xì)胞樣品室，問題就解決了。 類似這樣在科研工作中遇到的問題，很希望有一個(gè)平臺(tái)能架起我們用戶和企業(yè)溝通的橋梁，通過共同的努力來解決問題。期望中國生物器材網(wǎng)今后能夠再進(jìn)一步深層次的為科研用戶解決困難。 |